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      產品中心
      產品名稱:

      糖原磷酸化酶a(GPa)測試盒紫外分光光度法

      產品廠地: 上海市
      訪問次數: 359
      更新時間: 2022-05-30
      描述:糖原磷酸化酶a(GPa)測試盒紫外分光光度法公司正在出售的產品:Rustigian氏尿素肉湯進口、國產Rustigian Urea Broth100克細菌尿素試驗改良CAMP-BAP氏基礎進口、國產CAMP-BAP Agar Base Modified250克彎曲桿菌選擇性分離培養空腸彎曲菌基礎進口、國產Skirrow Medium Base250克用于空腸彎曲菌的分離培養空腸彎曲菌瓊脂基礎進口、

      產品介紹

      品牌其他品牌貨號BK-01S6983

      實驗結果判斷我有妙招:

      1、定量測定結果根據標準曲線計算樣品中待測物的含量。

      2、以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結果的閾值。

      3、以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性,P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑,P/N小于1.5為陰性。

      4、ELISA試劑盒目測定性法:加入底物經酶解和終止反應后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照,與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。

      與您分享常用不穩定試劑的分類及要求:

      ① 易揮發、低燃點的試劑要密封,放于陰涼、通風、遠離火源處保存。

      ② 與水蒸氣,水發生反應的物質要密封,并遠離水源保存。

      ③ 易與氧氣作用的試劑,應將其固體或晶體密封保存,不宜長期存放其水溶液,亞硫酸,氫硫酸溶液要密封存放,鉀,鈉,白磷更要采用液封形式。

      ④ 與二氧化碳反應的物質要密封保存,其相應的溶液較固體更易反應,所以更要注意密封保存。

      ⑤ 易揮發或自身分解的試劑要密封,放于陰涼通風處保存。

      本試劑盒僅供研究使用公司實驗室提供免費代測,7個工作日出結果,提供原始數據!

      產品名稱

      規格

      檢測方法

      貨號

      糖原磷酸化酶a(GPa)測試盒紫外分光光度法

      50管/48樣

      紫外分光光度法

      BK-01S6983

      商品介紹:

      測定意義:

      糖原磷酸化酶(Glycogen phosphorylase,GP,EC 2.4.1.1))是糖原分解代謝的關鍵酶,使糖原分子從非還原端逐個斷開α-1,4-糖苷鍵移去葡萄糖基,釋放1-磷酸葡萄糖,直至臨近糖原分子α-1,6-糖苷鍵分支點前4個葡萄糖基處。GP分為有活性的糖原磷酸化酶aGPa)和無活性的糖原磷酸化酶bGPb)兩種形式。糖原的分解主要在GPa的催化下進行。

      測定原理:

      未添加激活劑時,GPa催化糖原和無機磷產生葡萄糖殘基生成糖原和1-磷酸葡萄糖,磷酸葡萄糖變位酶和6-磷酸葡萄糖脫氫酶進一步依次催化NADP還原生成NADPH,在340nm下測定NADPH上升速率,即可反映GPa活性。

      需自備的儀器和用品:

      紫外分光光度計/酶標儀、臺式離心機、可調式移液器、1mL石英比色皿、研缽、冰和蒸餾水。

      試劑組成和配制:

      提取液:液體 100 mL×1 瓶,4℃保存。

      試劑一:液體 5 mL×1 瓶,4℃避光保存。

      試劑二:液體 15 mL×1 瓶,4℃保存。

      試劑三:液體 3 mL×1 瓶,4℃保存。

      試劑四:液體 3 mL×1 瓶,4℃保存。
      QQ截圖20220307153537.png

      操作步驟:

      1. 樣品的準備:

      a. 細胞樣品的準備:收集細胞,用4 ℃或冰浴預冷的PBS 或生理鹽水洗滌1-2遍。沉淀用預冷組織細胞裂解液4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類常見電動勻漿器) 。隨后勻漿液4℃離心,取上清作為待測樣品。

      b. 組織樣品的準備:動物用生理鹽水(0.9% NaCl ,含有0.16mg/ml) 灌流清除血液后獲取組織樣品。按照每100mg加入500-1000ul組織細胞裂解液比例, 4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類常見電動勻漿器) 。隨后勻漿液4 ℃離心,取上清作為待測樣品。

      d. 使用BCA蛋白濃度測定試劑盒(P1511)測定蛋白濃度。通常10-20ug蛋白的細胞或組織勻漿液樣品中SOD平均活力約1個活力單位左右(不同細胞和組織的差異會比較大,該活力范圍僅作為初步的參考) 。每種樣品準備20-100 ug蛋白量通常已經足夠用于后續檢測。

      e. 根據蛋白濃度和預計的蛋白使用量,用試劑盒提供的SOD檢測緩沖液適當稀釋樣品。例如,小鼠肝臟通常需要稀釋10-100 倍。準備好的樣品如果當天測定,可以冰浴保存;如果當天不能完成測定,可以-70 ℃凍存,但建議盡量當天完成測定。

      2. 試劑盒的準備工作:

      a. WST-8酶工作液的配制: 參照下表,根據待檢測樣品(包括標準品) 數量,配制適量WST-8酶工作液,配制好的WST-8酶工作液4 ℃或冰浴保存,可當天使用,但建議盡量現配現用。

      注意:由于酶溶液的用量較少且易沉降,必須注意在使用前先輕輕離心一下,然后適當混勻后再使用。

      b. 反應啟動工作液配制:將試劑盒提供的反應啟動液 (40X) 溶解后混勻,按1μl 反應啟動液(40X) 加入39μl SOD 檢測緩沖液的比例進行稀釋,即為反應啟動工作液。4℃或冰浴保存,可當天使用,但建議盡量現配現用。

      c. (可選做) SOD 標準品準備:需自備SOD標準品,用本試劑盒提供的稀釋液將SOD標準品稀釋至如下系列濃度:20U/ml,10U/ml ,5U/ml,2.5U/ml,1.25U/ml,0.625U/ml。在隨后的檢測中可以各取20微升,參考樣品進行檢測。說明:為避免稀釋后SOD酶活性的下降, SOD標準品宜現稀釋現使用;本試劑盒對于SOD的檢測并不需要SOD作為標準品,但可以使用SOD標準品作為陽性對照或作為對SOD活性定量的參考。

      吖啶黃素(2.5mg/支)  1ml/支*5

      2500U 末端脫氧核苷轉移  

      250mL Phosphate Buffer,0.5M, pH9.5  Phosphate Buffer,0.5M, pH9.5  常溫保存

      0.5mL X-Gal干粉 X -Gal Powder -20℃避光保存

      2 ug pOTB7 PPP2R1A pOTB7 PPP2R1A 低溫運輸,-20℃保存

      明膠  20支

      1瓶 WPMY-1細胞株 WPMY-1 低溫運輸和保存

      志賀氏菌增菌肉湯-新生 Shigella Broth 250g

      100g L- 谷 L-Glutamic Acid 室溫密封保存

      MC(不含瓊脂)  250g

      0.1mg 山羊抗兔IgG,熒光素488標記 Goat Anti-Rabbit IgG ,IF488 Conjugate  4℃保存

      糖原磷酸化酶a(GPa)測試盒紫外分光光度法SRRM4  絲/相關核基質蛋白4抗體 規格: 0.2ml

      PSCD1  細胞附著蛋白PSCD1抗體 規格: 0.1ml

      Rabbit Anti-Goat IgG/PE  PE標記的兔抗羊IgG 規格: 0.1ml

      Amisyn  突觸融合結合蛋白6抗體 規格: 0.2ml

      VCAM-1  管內皮細胞粘附分子抗體 規格: 0.1ml

      SH2D1A/SAP  信號傳導T淋巴細胞活化相關蛋白抗體 規格: 0.2ml

      hnRNP M/CEAR  異質性核糖核蛋白M抗體 規格: 0.2ml

      SLC39A11  溶質載體家族39成員11抗體 規格: 0.2ml

      GAJ/MND1  減數分裂核分裂蛋白1抗體 規格: 0.2ml

      VSV-G tag  VSV-G tag標簽抗體 規格: 0.1ml

      Mouse Anti-rat IgG/Cy5.5  Cy5.5標記的小鼠抗大鼠IgG 規格: 0.1ml

      Phospho-Bad(Ser155)  磷酸化相關死亡促進因子抗體 規格: 0.1ml

       


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