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      產品名稱:

      丙酮酸羧化酶(PC)測試盒紫外分光光度法

      產品廠地: 上海市
      訪問次數: 295
      更新時間: 2022-05-30
      描述:丙酮酸羧化酶(PC)測試盒紫外分光光度法公司正在出售的產品:結晶紫中性紅膽鹽葡萄糖瓊脂進口、國產VRBG Agar250克奶粉中坂崎桿菌的分離培養哥倫比亞CAN瓊脂基礎進口、國產Columbia CAN Agar Base250克分離革蘭氏陽性球菌濾膜糞大腸菌瓊脂進口、國產M-FC Agar250克大腸桿菌群的濾膜法檢測濾膜糞大腸菌肉湯進口、國產M-FC Broth250克大腸桿菌群的濾膜法檢測

      產品介紹

      品牌其他品牌貨號BK-01S6979

      本試劑盒僅供研究使用公司實驗室提供免費代測,7個工作日出結果,提供原始數據!

      產品名稱

      規格

      檢測方法

      貨號

      丙酮酸羧化酶(PC)測試盒紫外分光光度法

      50管/48樣

      紫外分光光度法

      BK-01S6979

      商品介紹:

      測定意義:

      丙酮酸羧化酶(pyruvate carboxylase,PC,EC 6.4.1.1)廣泛存在于動物、霉菌和酵母的線粒體中,催化丙酮酸、ATP、CO2和水生成草酰乙酸、ADPPi,是糖異生過程的個限速酶,在保證血糖的動態平衡方面起著重要的作用。

      測定原理:

      PC催化丙酮酸、ATP、CO2和水生成草酰乙酸、ADPPi,蘋果酸脫氫酶進一步催化草酰乙酸和NADH生成蘋果酸和NAD+,在340nm下測定NADH氧化速率,即可反映PC活性。

      需自備的儀器和用品:

      分光光度計、臺式離心機、可調式移液器、1 mL石英比色皿、研缽、冰和蒸餾水。

      試劑組成和配制:

      提取液:液體 100 mL×1 瓶,4℃保存。

      試劑一:液體 5 mL×1 瓶,4℃避光保存。

      試劑二:液體 15 mL×1 瓶,4℃保存。

      試劑三:液體 3 mL×1 瓶,4℃保存。

      試劑四:液體 3 mL×1 瓶,4℃保存。
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      實驗結果判斷我有妙招:

      1、定量測定結果根據標準曲線計算樣品中待測物的含量。

      2、以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結果的閾值。

      3、以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性,P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑,P/N小于1.5為陰性。

      4、ELISA試劑盒目測定性法:加入底物經酶解和終止反應后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照,與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。

      與您分享常用不穩定試劑的分類及要求:

      ① 易揮發、低燃點的試劑要密封,放于陰涼、通風、遠離火源處保存。

      ② 與水蒸氣,水發生反應的物質要密封,并遠離水源保存。

      ③ 易與氧氣作用的試劑,應將其固體或晶體密封保存,不宜長期存放其水溶液,亞硫酸,氫硫酸溶液要密封存放,鉀,鈉,白磷更要采用液封形式。

      ④ 與二氧化碳反應的物質要密封保存,其相應的溶液較固體更易反應,所以更要注意密封保存。

      ⑤ 易揮發或自身分解的試劑要密封,放于陰涼通風處保存。

       

      操作步驟:

      1. 樣品的準備:

      a. 細胞樣品的準備:收集細胞,用4 ℃或冰浴預冷的PBS 或生理鹽水洗滌1-2遍。沉淀用預冷組織細胞裂解液4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類常見電動勻漿器) 。隨后勻漿液4℃離心,取上清作為待測樣品。

      b. 組織樣品的準備:動物用生理鹽水(0.9% NaCl ,含有0.16mg/ml) 灌流清除血液后獲取組織樣品。按照每100mg加入500-1000ul組織細胞裂解液比例, 4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類常見電動勻漿器) 。隨后勻漿液4 ℃離心,取上清作為待測樣品。

      d. 使用BCA蛋白濃度測定試劑盒(P1511)測定蛋白濃度。通常10-20ug蛋白的細胞或組織勻漿液樣品中SOD平均活力約1個活力單位左右(不同細胞和組織的差異會比較大,該活力范圍僅作為初步的參考) 。每種樣品準備20-100 ug蛋白量通常已經足夠用于后續檢測。

      e. 根據蛋白濃度和預計的蛋白使用量,用試劑盒提供的SOD檢測緩沖液適當稀釋樣品。例如,小鼠肝臟通常需要稀釋10-100 倍。準備好的樣品如果當天測定,可以冰浴保存;如果當天不能完成測定,可以-70 ℃凍存,但建議盡量當天完成測定。

      2. 試劑盒的準備工作:

      a. WST-8酶工作液的配制: 參照下表,根據待檢測樣品(包括標準品) 數量,配制適量WST-8酶工作液,配制好的WST-8酶工作液4 ℃或冰浴保存,可當天使用,但建議盡量現配現用。

      注意:由于酶溶液的用量較少且易沉降,必須注意在使用前先輕輕離心一下,然后適當混勻后再使用。

      b. 反應啟動工作液配制:將試劑盒提供的反應啟動液 (40X) 溶解后混勻,按1μl 反應啟動液(40X) 加入39μl SOD 檢測緩沖液的比例進行稀釋,即為反應啟動工作液。4℃或冰浴保存,可當天使用,但建議盡量現配現用。

      c. (可選做) SOD 標準品準備:需自備SOD標準品,用本試劑盒提供的稀釋液將SOD標準品稀釋至如下系列濃度:20U/ml,10U/ml ,5U/ml,2.5U/ml,1.25U/ml,0.625U/ml。在隨后的檢測中可以各取20微升,參考樣品進行檢測。說明:為避免稀釋后SOD酶活性的下降, SOD標準品宜現稀釋現使用;本試劑盒對于SOD的檢測并不需要SOD作為標準品,但可以使用SOD標準品作為陽性對照或作為對SOD活性定量的參考。

      2 ug pP-αSUMO3 pP-αSUMO3 低溫運輸,-20℃保存

      葡萄糖銨  20支

      2 ug pCaspase3-sensor pCaspase3-sensor 低溫運輸,-20℃保存

      副溶血性弧菌成套生化鑒定管(HRGB)  10種*2套/盒*5盒

      25mg 牛胰島素 Insulin From Bovine Pancreas -20℃保存

      50T 流感嗜血桿菌B型PCR檢測試劑盒  低溫運輸,-20℃保存

      5mL 間充質干細胞軟骨細胞分化生長因子 Growth Factor For Cell Culture -20℃保存

      25g Ammonium Persulfate Solution(過硫酸銨溶液),10% Ammonium Persulfate Solution,10% 常溫保存

      10mL DNA尿素-PAGE上樣液 DNA Urea-PAGE Loading Buffer -20℃保存

      2 ug pGC-silencer-U6-GFP pGC-silencer-U6-GFP 低溫運輸,-20℃保存

      麥迪、麥白檢定(普通輕質斜面) Wheat albomycin Test Medium 250g

      丙酮酸羧化酶(PC)測試盒紫外分光光度法CCDC8  卷曲螺旋結構域蛋白8抗體 規格: 0.2mlPCDHA8  原鈣粘附蛋白α8抗體 規格: 0.2ml

      NDUFAF4  激素調節增值細胞相關蛋白抗體 規格: 0.2mlRSRC2  食道抑制生蛋白抗體 規格: 0.2ml

      large S protein  人乙肝毒pre S1/S2蛋白抗體 規格: 0.1mlCDK5  周期素依賴性激5抗體 規格: 0.1ml

      MLK2/MAP3K10  絲裂原活化蛋白激3K10抗體 規格: 0.2mlNucleolin/C23  核仁蛋白C23抗體 規格: 0.2ml

      AMBRA1  自噬相關基因AMBRA1抗體 規格: 0.2mlAPS  APS抗體 規格: 0.1ml

      GRP  促胃泌素釋放肽抗體 規格: 0.2mlAPH1a  早老素γ分泌抗體 規格: 0.2ml

      IQCG  IQCG蛋白抗體 規格: 0.2mlSOSSC/C9orf80  單鏈DNA結合蛋白相互作用蛋白1 規格: 0.2ml

      phospho-PRKCA(Ser657+Tyr658)  磷酸化蛋白激C抗體 規格: 0.1mlPhospho-PAK4(Ser99)  磷酸化p21激活激4抗體 規格: 0.1ml

      PDZD7  PDZ結構域PDZK7蛋白抗體 規格: 0.2mlCIDE A  DNA斷裂因子相似蛋白A抗體 規格: 0.2ml

      phospho-PTK2(Tyr576+Tyr577)  磷酸化粘著斑激抗體 規格: 0.1mlGlycerol kinase  甘油激抗體 規格: 0.2ml

      ATG1/ULK1  自噬相關蛋白1抗體 規格: 0.2mlPRR11  富含脯蛋白11抗體 規格: 0.2ml

      TSHR  促甲狀素受體抗體 規格: 0.1mlMAGEA10  黑色素瘤相關抗原10抗體 規格: 0.2ml

       


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