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      產品中心
      產品名稱:

      土壤脫氫酶(SDHA)測試盒微量法

      產品廠地: 上海市
      訪問次數: 340
      更新時間: 2022-05-30
      描述:土壤脫氫酶(SDHA)測試盒微量法公司正在出售的產品:疊氮鈉葡萄糖肉湯 進口、國產Azide Dextrose Broth用于鏈球菌的增菌培養250乙基紫疊氮鈉肉湯 進口、國產Ethyl Violet Azide Broth用于鏈球菌的增菌培養250KF鏈球菌瓊脂 進口、國產KF Streptococcus Agar用于鏈球菌的選擇性分離及計數(SN標準)100LIM進口、國產LIM Med

      產品介紹

      品牌其他品牌貨號BK-01S6843

      本試劑盒僅供研究使用公司實驗室提供免費代測,7個工作日出結果,提供原始數據!

      產品名稱

      規格

      檢測方法

      貨號

      土壤脫氫酶(SDHA)測試盒微量法

      100管/96樣

      微量法

      BK-01S6843

      商品介紹:

      測定意義:

      土壤脫氫酶(Soil dehydrogenase, sDHA)的活性可以反映土壤體系內活性微生物量以及其對有機物的降解活性,可以作為土壤微生物的降解性能指標。

      測定原理:

      氫受體2, 3, 5 - 氯化三苯基四氮唑(2,3,5-Triphenyl Tetrazolium Chloride, TTC)在細胞呼吸過程中接受氫以后,被還原為三苯基甲鐟(Triphenyl Formazone, TF),TF呈現紅色,在波長485nm處有最大吸收峰,采用分光光度法于485nm測定其吸光值,即得土壤脫氫酶活性。

      自備實驗儀器及用品:

      篩子、天平、恒溫培養箱或水浴鍋、低溫離心機、漏斗,濾紙、可見分光光度計、玻璃比色可見分光光度計/酶標儀、微量石英比色皿/96孔板、冰、蒸餾水、丙酮(不允許快遞,請用戶自備)。

      試劑組成和配制:

      提取液:液體 100 mL×1 瓶,4℃保存。

      試劑一:液體 5 mL×1 瓶,4℃避光保存。

      試劑二:液體 15 mL×1 瓶,4℃保存。

      試劑三:液體 3 mL×1 瓶,4℃保存。

      試劑四:液體 3 mL×1 瓶,4℃保存。
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      實驗結果判斷我有妙招:

      1、定量測定結果根據標準曲線計算樣品中待測物的含量。

      2、以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結果的閾值。

      3、以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性,P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑,P/N小于1.5為陰性。

      4、ELISA試劑盒目測定性法:加入底物經酶解和終止反應后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照,與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。

      與您分享常用不穩定試劑的分類及要求:

      ① 易揮發、低燃點的試劑要密封,放于陰涼、通風、遠離火源處保存。

      ② 與水蒸氣,水發生反應的物質要密封,并遠離水源保存。

      ③ 易與氧氣作用的試劑,應將其固體或晶體密封保存,不宜長期存放其水溶液,亞硫酸,氫硫酸溶液要密封存放,鉀,鈉,白磷更要采用液封形式。

      ④ 與二氧化碳反應的物質要密封保存,其相應的溶液較固體更易反應,所以更要注意密封保存。

      ⑤ 易揮發或自身分解的試劑要密封,放于陰涼通風處保存。

       

      操作步驟:

      1. 樣品的準備:

      a. 細胞樣品的準備:收集細胞,用4 ℃或冰浴預冷的PBS 或生理鹽水洗滌1-2遍。沉淀用預冷組織細胞裂解液4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類常見電動勻漿器) 。隨后勻漿液4℃離心,取上清作為待測樣品。

      b. 組織樣品的準備:動物用生理鹽水(0.9% NaCl ,含有0.16mg/ml) 灌流清除血液后獲取組織樣品。按照每100mg加入500-1000ul組織細胞裂解液比例, 4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類常見電動勻漿器) 。隨后勻漿液4 ℃離心,取上清作為待測樣品。

      d. 使用BCA蛋白濃度測定試劑盒(P1511)測定蛋白濃度。通常10-20ug蛋白的細胞或組織勻漿液樣品中SOD平均活力約1個活力單位左右(不同細胞和組織的差異會比較大,該活力范圍僅作為初步的參考) 。每種樣品準備20-100 ug蛋白量通常已經足夠用于后續檢測。

      e. 根據蛋白濃度和預計的蛋白使用量,用試劑盒提供的SOD檢測緩沖液適當稀釋樣品。例如,小鼠肝臟通常需要稀釋10-100 倍。準備好的樣品如果當天測定,可以冰浴保存;如果當天不能完成測定,可以-70 ℃凍存,但建議盡量當天完成測定。

      2. 試劑盒的準備工作:

      a. WST-8酶工作液的配制: 參照下表,根據待檢測樣品(包括標準品) 數量,配制適量WST-8酶工作液,配制好的WST-8酶工作液4 ℃或冰浴保存,可當天使用,但建議盡量現配現用。

      注意:由于酶溶液的用量較少且易沉降,必須注意在使用前先輕輕離心一下,然后適當混勻后再使用。

      b. 反應啟動工作液配制:將試劑盒提供的反應啟動液 (40X) 溶解后混勻,按1μl 反應啟動液(40X) 加入39μl SOD 檢測緩沖液的比例進行稀釋,即為反應啟動工作液。4℃或冰浴保存,可當天使用,但建議盡量現配現用。

      c. (可選做) SOD 標準品準備:需自備SOD標準品,用本試劑盒提供的稀釋液將SOD標準品稀釋至如下系列濃度:20U/ml,10U/ml ,5U/ml,2.5U/ml,1.25U/ml,0.625U/ml。在隨后的檢測中可以各取20微升,參考樣品進行檢測。說明:為避免稀釋后SOD酶活性的下降, SOD標準品宜現稀釋現使用;本試劑盒對于SOD的檢測并不需要SOD作為標準品,但可以使用SOD標準品作為陽性對照或作為對SOD活性定量的參考。

      1mL C溶液,5mg/mL Mitomycin Solution  4℃避光保存

      100mL MOPSO Buffer,0.2M,pH7.5  MOPSO Buffer,0.2M,pH7.5  常溫保存

      5%乳糖發酵管  20支

      2 ug pCAMBIA3300 pCAMBIA3300 低溫運輸,-20℃保存

      雙水解試驗用(AD) Aaginine dehydrolase Medium 5g

      5g  Inosine,Free Base   室溫干燥保存

      50T 淋球菌PCR檢測試劑盒  低溫運輸,-20℃保存

      25 mg DiBAC4(3) Fluorescent Probe and Tracer -20℃保存

      50mL Ammonium Acetate Solution(乙酸銨溶液),1M  Ammonium Acetate Solution,1M  常溫保存

      10mL miRNA尿素-PAGE上樣液,6× miRNAoN -20℃保存

      2 ug pYX212-VHB pYX212-VHB 低溫運輸,-20℃保存

      土壤脫氫酶(SDHA)測試盒微量法Dog IgM/Cy7  Cy7標記的兔抗犬IgM抗體 規格: 0.1mlDCBLD2  內皮細胞和平滑肌細胞衍生的神經纖毛蛋白抗體 規格: 0.2ml

      ANKRD45/CT117  瘤/睪抗原117 規格: 0.2mlVAPA  囊泡相關膜蛋白相關蛋白A抗體 規格: 0.2ml

      Kappa-casein/CSN3  κ-酪蛋白抗體 規格: 0.2mlBeta-lactoglobulin  β-球蛋白抗體 規格: 1ml

      Goat anti-Mouse IgG whole serum  羊抗小鼠IgG抗清 規格: 1mlMSR1/CD204  巨噬細胞清道夫受體1/2/3抗體 規格: 0.2ml

      Phospho-PRKACB(Thr198)  磷酸化蛋白激C亞性抗體 規格: 0.1mlRabbit Anti-chicken IgG/Cy3  Cy3標記的兔抗雞IgG 規格: 0.1ml

      TNFRSF14/HVEM  瘤壞死因子受體超家族成員14抗體 規格: 0.2mlBTG3  高表達神經上皮蛋白BTG3抗體 規格: 0.2ml

      KARS2/Lysyl tRNA synthetase  賴tRNA的連接抗體 規格: 0.2mlLCMT1  亮羧基甲基轉移1抗體 規格: 0.2ml

      EphA4  酪蛋白激A4抗體 規格: 0.1mlphospho-Cdc25B (Ser149)  磷酸化細胞分裂周期蛋白25B抗體 規格: 0.1ml

      phospho-B-Raf (Ser602)  磷酸化B-Raf抗體 規格: 0.1mlRabbit Anti-mouse IgG-Fc/FITC  FITC標記的兔抗小鼠IgG-Fc 規格: 0.1ml

      Rabbit Anti-Bovine IgM/PE-Cy7  PE-Cy7標記的兔抗牛IgM 規格: 0.1mlRELN/Reelin  絡絲蛋白抗體 規格: 0.1ml

      phospho-STAT1 (Ser727)  磷酸化信號轉導與轉錄激活因子1抗體 規格: 0.1mlFAM155A  FAM155A蛋白抗體 規格: 0.2ml

      HOXB8  同源盒蛋白B8抗體 規格: 0.2mlLMO2  T淋巴細胞易位蛋白2抗體 規格: 0.2ml

       


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