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      產品名稱:

      蔗糖合成酶(分解方向 SSⅠ)測試盒微量法

      產品廠地: 上海市
      訪問次數: 267
      更新時間: 2022-05-24
      描述:蔗糖合成酶(分解方向 SSⅠ)測試盒微量法公司正在出售的產品:淀粉水解培養基 英文名稱:The Hydrolysis of Starch Medium 產品規格:250g 硅酸鹽細菌培養基 英文名稱:Silicate Bacteria Medium 產品規格:250g GVC增菌液 英文名稱:GVC Enrichment Broth 產品規格:250g BSSA培養基 英文名稱:BSSA Medi

      產品介紹

      品牌其他品牌貨號BK-01S6703

      商品介紹:

      測定意義:

      蔗糖是源(葉片等)光合產物向"器官運輸的主要形態。蔗糖合成酶(Sucrose Synthase, EC 2.4.1.13)是雙向反應酶,既可催化蔗糖合成又可催化蔗糖分解,是蔗糖代謝的關鍵酶之一。研究其分解方向SS-Ⅰ的活性對于植物蔗糖降解以及淀粉合成具有重要意義。

      測定原理

      SS-Ⅰ催化蔗糖和UDP生成游離果糖和UDPG,采用3,5-二硝基水楊酸法測定還原糖的含量來反映酶活性的高低。

      需自備的儀器和用品

      可見分光光度計/酶標儀、水浴鍋、離心機、移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽、冰

      提取液:液體 100 mL×1 瓶,4℃保存。

      試劑一:液體 5 mL×1 瓶,4℃避光保存。

      試劑二:液體 15 mL×1 瓶,4℃保存。

      試劑三:液體 3 mL×1 瓶,4℃保存。

      試劑四:液體 3 mL×1 瓶,4℃保存。

      本試劑盒僅供研究使用公司實驗室提供免費代測,7個工作日出結果,提供原始數據!

      產品名稱

      規格

      檢測方法

      貨號

      蔗糖合成酶(分解方向 SSⅠ)測試盒微量法

      100管/48樣

      微量法

      BK-01S6703

      11.png 

      實驗結果判斷我有妙招:

      1、定量測定結果根據標準曲線計算樣品中待測物的含量。

      2、以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結果的閾值。

      3、以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性,P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑,P/N小于1.5為陰性。

      4、ELISA試劑盒目測定性法:加入底物經酶解和終止反應后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照,與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。

      與您分享常用不穩定試劑的分類及要求:

      ① 易揮發、低燃點的試劑要密封,放于陰涼、通風、遠離火源處保存。

      ② 與水蒸氣,水發生反應的物質要密封,并遠離水源保存。

      ③ 易與氧氣作用的試劑,應將其固體或晶體密封保存,不宜長期存放其水溶液,亞硫酸,氫硫酸溶液要密封存放,鉀,鈉,白磷更要采用液封形式。

      ④ 與二氧化碳反應的物質要密封保存,其相應的溶液較固體更易反應,所以更要注意密封保存。

      ⑤ 易揮發或自身分解的試劑要密封,放于陰涼通風處保存。

      操作步驟:

      1. 樣品的準備:

      a. 細胞樣品的準備:收集細胞,用4 ℃或冰浴預冷的PBS 或生理鹽水洗滌1-2遍。沉淀用預冷組織細胞裂解液4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類常見電動勻漿器) 。隨后勻漿液4℃離心,取上清作為待測樣品。

      b. 組織樣品的準備:動物用生理鹽水(0.9% NaCl ,含有0.16mg/ml) 灌流清除血液后獲取組織樣品。按照每100mg加入500-1000ul組織細胞裂解液比例, 4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類常見電動勻漿器) 。隨后勻漿液4 ℃離心,取上清作為待測樣品。

      d. 使用BCA蛋白濃度測定試劑盒(P1511)測定蛋白濃度。通常10-20ug蛋白的細胞或組織勻漿液樣品中SOD平均活力約1個活力單位左右(不同細胞和組織的差異會比較大,該活力范圍僅作為初步的參考) 。每種樣品準備20-100 ug蛋白量通常已經足夠用于后續檢測。

      e. 根據蛋白濃度和預計的蛋白使用量,用試劑盒提供的SOD檢測緩沖液適當稀釋樣品。例如,小鼠肝臟通常需要稀釋10-100 倍。準備好的樣品如果當天測定,可以冰浴保存;如果當天不能完成測定,可以-70 ℃凍存,但建議盡量當天完成測定。

      2. 試劑盒的準備工作:

      a. WST-8酶工作液的配制: 參照下表,根據待檢測樣品(包括標準品) 數量,配制適量WST-8酶工作液,配制好的WST-8酶工作液4 ℃或冰浴保存,可當天使用,但建議盡量現配現用。

      注意:由于酶溶液的用量較少且易沉降,必須注意在使用前先輕輕離心一下,然后適當混勻后再使用。

      b. 反應啟動工作液配制:將試劑盒提供的反應啟動液 (40X) 溶解后混勻,按1μl 反應啟動液(40X) 加入39μl SOD 檢測緩沖液的比例進行稀釋,即為反應啟動工作液。4℃或冰浴保存,可當天使用,但建議盡量現配現用。

      c. (可選做) SOD 標準品準備:需自備SOD標準品,用本試劑盒提供的稀釋液將SOD標準品稀釋至如下系列濃度:20U/ml,10U/ml ,5U/ml,2.5U/ml,1.25U/ml,0.625U/ml。在隨后的檢測中可以各取20微升,參考樣品進行檢測。說明:為避免稀釋后SOD酶活性的下降, SOD標準品宜現稀釋現使用;本試劑盒對于SOD的檢測并不需要SOD作為標準品,但可以使用SOD標準品作為陽性對照或作為對SOD活性定量的參考。

      1瓶 C1.Ly1+2-/9細胞株 C1.Ly1+2-/9 低溫運輸和保存

      50mL RIPA Buffer,5X  RIPA Buffer,5X  常溫保存

      1 管 DB3.1大腸桿菌 DB3.1 E.coli Strain -80℃保存

      2 ug pRetroX-IRES-ZsGreen1 pRetroX-IRES-ZsGreen1 低溫運輸,-20℃保存

      副溶血性弧菌成套生化鑒定管(SN/T0173-2010)  16種*1套/盒*5盒

      2 ug pcDNA3.1(+)/GFP pcDNA3.1(+)/GFP 低溫運輸,-20℃保存

      營養鹽瓊脂 Nutrient agar 250g

      100g 馬來酸 Maleic Acid 室溫密封保存

      50T 諾沃克病毒PCR檢測試劑盒  低溫運輸,-20℃保存

      1g 氯吡苯脲 Forchior Fennron    室溫保存

      100mL Bicine Buffer,0.5M,pH8.5   Bicine Buffer,0.5M,pH8.5   常溫保存

      蔗糖合成酶(分解方向 SSⅠ)測試盒微量法AKAP2  蛋白激A2抗體 規格: 0.2ml

      Rabbit Anti-rat IgM/Alexa Fluor 488  Alexa Fluor 488標記的兔抗大鼠IgM 規格: 0.1ml

      CD329/SIGLEC8  CD329抗體 規格: 0.2ml

      KCNE1  鉀離子通道蛋白家族成員1抗體 規格: 0.2ml

      DYDC1  DYDC1蛋白抗體 規格: 0.2ml

      Phospho-Lamin A/C(Ser22)  磷酸化核纖層蛋白A/C抗體 規格: 0.1ml

      Phospho-Dab1 (Tyr220)  磷酸化Disabled 1抗體 規格: 0.1ml

      ACTH (18-39)  促上皮質激素ACTH(18-39)抗體 0.1ml

      Mouse Anti-rabbit IgG/Cy5.5  Cy5.5標記的小鼠抗兔IgG 規格: 0.1ml

      Phospho-CHEK1 (Ser296)  磷酸化細胞周期檢測點激1抗體 規格: 0.1ml

      CD336/NKp44/NCR2  細胞毒性受體NK-p44抗體 規格: 0.2ml

      Mouse Anti-rabbit IgG/Alexa Fluor 350  Alexa Fluor 350標記的小鼠抗兔IgG 規格: 0.1ml

       


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