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      產品中心
      產品名稱:

      堿性蛋白酶測試盒微量法

      產品廠地: 上海市
      訪問次數: 292
      更新時間: 2022-05-24
      描述:堿性蛋白酶測試盒微量法公司正在出售的產品:抗生素檢定培養基2號(低pH) 英文名稱:Antibiotic Agar NO.2 產品規格:250g 抗生素檢定培養基3號 英文名稱:Antibiotic Agar NO.3 產品規格:250g 抗生素檢定培養基4號 英文名稱:Antibiotic Agar NO.4 產品規格:250g 抗生素檢定培養基7號 英文名稱:Antibiotic Agar N

      產品介紹

      品牌其他品牌BK-01S6627BK-01S6627

      商品介紹:

      測定意義:

      AKP是指在堿性條件下催化蛋白質肽鍵水解的酶類,屬于絲。此外,該酶還能夠水解酯鍵、酰胺鍵,具有轉酯及轉肽的功能。該酶是主要工業用酶之一,廣泛應用于制藥、絲綢、食品、制革等行業。

      測定原理:

      在堿性條件下,AKP水解酪蛋白生成酪;在堿性條件下,酪還原磷鉬酸生成鎢藍;鎢藍在680nm有特征吸收峰,測定680nm吸光度增加速率,來計算AKP活性。

      自備儀器和用品:

      可見分光光度計/酶標儀、微量玻璃比色皿/96孔板、水浴鍋、磁力攪拌器、可調式移液槍、0.5 mL EP管和蒸餾水。

      提取液:液體 100 mL×1 瓶,4℃保存。

      試劑一:液體 5 mL×1 瓶,4℃避光保存。

      試劑二:液體 15 mL×1 瓶,4℃保存。

      試劑三:液體 3 mL×1 瓶,4℃保存。

      試劑四:液體 3 mL×1 瓶,4℃保存。

      本試劑盒僅供研究使用公司實驗室提供免費代測,7個工作日出結果,提供原始數據!

      產品名稱

      規格

      檢測方法

      貨號

      堿性蛋白酶測試盒微量法

      100管/48樣

      微量法

      BK-01S6627

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      實驗結果判斷我有妙招:

      1、定量測定結果根據標準曲線計算樣品中待測物的含量。

      2、以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結果的閾值。

      3、以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性,P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑,P/N小于1.5為陰性。

      4、ELISA試劑盒目測定性法:加入底物經酶解和終止反應后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照,與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。

      與您分享常用不穩定試劑的分類及要求:

      ① 易揮發、低燃點的試劑要密封,放于陰涼、通風、遠離火源處保存。

      ② 與水蒸氣,水發生反應的物質要密封,并遠離水源保存。

      ③ 易與氧氣作用的試劑,應將其固體或晶體密封保存,不宜長期存放其水溶液,亞硫酸,氫硫酸溶液要密封存放,鉀,鈉,白磷更要采用液封形式。

      ④ 與二氧化碳反應的物質要密封保存,其相應的溶液較固體更易反應,所以更要注意密封保存。

      ⑤ 易揮發或自身分解的試劑要密封,放于陰涼通風處保存。

      操作步驟:

      1. 樣品的準備:

      a. 細胞樣品的準備:收集細胞,用4 ℃或冰浴預冷的PBS 或生理鹽水洗滌1-2遍。沉淀用預冷組織細胞裂解液4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類常見電動勻漿器) 。隨后勻漿液4℃離心,取上清作為待測樣品。

      b. 組織樣品的準備:動物用生理鹽水(0.9% NaCl ,含有0.16mg/ml) 灌流清除血液后獲取組織樣品。按照每100mg加入500-1000ul組織細胞裂解液比例, 4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類常見電動勻漿器) 。隨后勻漿液4 ℃離心,取上清作為待測樣品。

      d. 使用BCA蛋白濃度測定試劑盒(P1511)測定蛋白濃度。通常10-20ug蛋白的細胞或組織勻漿液樣品中SOD平均活力約1個活力單位左右(不同細胞和組織的差異會比較大,該活力范圍僅作為初步的參考) 。每種樣品準備20-100 ug蛋白量通常已經足夠用于后續檢測。

      e. 根據蛋白濃度和預計的蛋白使用量,用試劑盒提供的SOD檢測緩沖液適當稀釋樣品。例如,小鼠肝臟通常需要稀釋10-100 倍。準備好的樣品如果當天測定,可以冰浴保存;如果當天不能完成測定,可以-70 ℃凍存,但建議盡量當天完成測定。

      2. 試劑盒的準備工作:

      a. WST-8酶工作液的配制: 參照下表,根據待檢測樣品(包括標準品) 數量,配制適量WST-8酶工作液,配制好的WST-8酶工作液4 ℃或冰浴保存,可當天使用,但建議盡量現配現用。

      注意:由于酶溶液的用量較少且易沉降,必須注意在使用前先輕輕離心一下,然后適當混勻后再使用。

      b. 反應啟動工作液配制:將試劑盒提供的反應啟動液 (40X) 溶解后混勻,按1μl 反應啟動液(40X) 加入39μl SOD 檢測緩沖液的比例進行稀釋,即為反應啟動工作液。4℃或冰浴保存,可當天使用,但建議盡量現配現用。

      c. (可選做) SOD 標準品準備:需自備SOD標準品,用本試劑盒提供的稀釋液將SOD標準品稀釋至如下系列濃度:20U/ml,10U/ml ,5U/ml,2.5U/ml,1.25U/ml,0.625U/ml。在隨后的檢測中可以各取20微升,參考樣品進行檢測。說明:為避免稀釋后SOD酶活性的下降, SOD標準品宜現稀釋現使用;本試劑盒對于SOD的檢測并不需要SOD作為標準品,但可以使用SOD標準品作為陽性對照或作為對SOD活性定量的參考。

      250 T 過氧化氫定量分析試劑盒(脂兼容性) Oxidative Stress Detection Kit 常溫保存

      50mL Manganese Sulfate Solution(硫酸錳溶液),0.5M  Manganese Sulfate Solution,0.5M  常溫保存

      100uL 卡拉抗性基因PCR引物 Common PCR Primer -20℃保存

      250ml Glucose-Gelatin Veronal Buffer (GGVB)   Glucose-Gelatin Veronal Buffer (GGVB)   常溫保存

      布氏菌選擇性培養基 Brucella Selective Medium 250g

      1瓶 PC12細胞株 PC12 低溫運輸和保存

      乙基紫疊氮鈉肉湯 Ethyl Violet Aziode Broth 250g

      1g CHAPS CHAPS 室溫保存

      250mL Zinc-Formalin  Zinc-Formalin  常溫保存

      25mL 十二烷基磺酸鈉清除劑 SDS Erasol -20℃保存

      2 ug pBBR1-MCS3 pBBR1-MCS3 低溫運輸,-20℃保存

      堿性蛋白酶測試盒微量法HSL/LIPE  荷爾蒙敏脂肪抗體 規格: 0.1mlPhospho-NR1D1(Ser55/59)  磷酸化細胞核受體Rev-Erbα抗體 規格: 0.1ml

      BNIP2  Bcl2相互作用蛋白2抗體 規格: 0.1mlRabbit Anti-human IgG F(ab')2/Cy3  Cy3標記的兔抗人IgG F(ab')2  規格: 0.1ml

      EGFL7  類表皮生因子域7抗體 規格: 0.1mlTransthyretin  轉甲狀素蛋白抗體 規格: 0.1ml

      phospho-c-Raf(Ser259)  磷酸化原基因c-Raf抗體 規格: 0.1mlWSTF  轉錄因子WSTF抗體 規格: 0.2ml

      IGSF11  大腦和睪特異性免疫球蛋白超家族成員11抗體 規格: 0.2mlPhospho-p90RSK (Thr573)  磷酸化絲/蘇激p90RSK蛋白抗體 規格: 0.1ml

      RASSF7  RAS家族關聯結構域蛋白7抗體 規格: 0.2mlGCDGP15/SABP  囊性組織液體蛋白15抗體 規格: 0.1ml

      Phospho-Torc1/Crtc1 (Ser151)  磷酸化CREB轉錄共激活因子TORC1抗體 規格: 0.1mlADAR1 (N-terminus)  雙鏈RNA苷酸脫氨基抗體(N端) 0.2ml

      MIC1/C18orf8  結腸相關蛋白MIC1抗體 規格: 0.2mlDNAJB4/HSP40 homolog  熱休克蛋白家族40抗體 規格: 0.1ml

      PRL1/PTP4A1  肝再生磷酸酯1抗體 規格: 0.1mlMouse Anti-rat IgG/HRP  辣根過氧化物標記的小鼠抗大鼠IgG 規格: 0.1ml

      CD158b2  NK細胞抑制性受體2DL3抗體 規格: 0.2mlKLHL23  Kelch樣蛋白23抗體 規格: 0.2ml

      Rabbit Anti-human sIgA/FITC  FITC標記的兔抗人分泌型IgA 規格: 100ugCK1+5+10+14  高分子量角蛋白抗體 規格: 0.2ml

      TRIM32  TRIM32抗體 規格: 0.1mlFBXO28  FBXO28蛋白抗體 規格: 0.2ml

       


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