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      產品名稱:

      3磷酸甘油酸激酶(PGK)測試盒微量法

      產品廠地: 上海市
      訪問次數: 334
      更新時間: 2022-05-24
      描述:3磷酸甘油酸激酶(PGK)測試盒微量法公司正在出售的產品:胰酪大豆胨液體培養基(TSB)(2015藥典) 英文名稱:TSB 產品規格:250g 硫乙醇酸鹽流體培養基(顆粒) 英文名稱: 產品規格:250g 鹽緩沖稀釋液(ph7.2) 英文名稱: 產品規格:9ml*20支 卵黃氯化鈉瓊脂培養基 英文名稱:Egg-Yolk Salt Agar Base 產品規格:250g

      產品介紹

      品牌其他品牌貨號BK-01S6615

      商品介紹:

      測定意義:

      3-磷酸甘油酸激酶是糖酵解的關鍵酶,廣泛存在于動植物和微生物體內,催化1,3-二磷酸甘油酸轉變為3-磷酸甘油酸,產生1分子ATP,具有影響DNA復制和修補及刺激病毒RNA合成等生物學功能,廣泛應用于藥物靶標設計。

      測定原理

      3-磷酸甘油酸激酶催化3-磷酸甘油酸和ATP產生1,3-二磷酸甘油酸和ADP,1,3-二磷酸甘油酸在3-磷酸甘油醛脫氫酶和NADH作用下產生3-磷酸甘油醛、NAD和磷酸,340nm處的吸光度變化反映了3-磷酸甘油酸激酶的活性的高低。

      自備實驗用品及儀器

      天平、低溫離心機、研缽、紫外分光光度計、1 mL石英比色皿。

      提取液:液體 100 mL×1 瓶,4℃保存。

      試劑一:液體 5 mL×1 瓶,4℃避光保存。

      試劑二:液體 15 mL×1 瓶,4℃保存。

      試劑三:液體 3 mL×1 瓶,4℃保存。

      試劑四:液體 3 mL×1 瓶,4℃保存。

      本試劑盒僅供研究使用公司實驗室提供免費代測,7個工作日出結果,提供原始數據!

      產品名稱

      規格

      檢測方法

      貨號

      3磷酸甘油酸激酶(PGK)測試盒微量法

      100管/96樣

      微量法

      BK-01S6615

      11.png 

      實驗結果判斷我有妙招:

      1、定量測定結果根據標準曲線計算樣品中待測物的含量。

      2、以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結果的閾值。

      3、以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性,P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑,P/N小于1.5為陰性。

      4、ELISA試劑盒目測定性法:加入底物經酶解和終止反應后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照,與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。

      與您分享常用不穩定試劑的分類及要求:

      ① 易揮發、低燃點的試劑要密封,放于陰涼、通風、遠離火源處保存。

      ② 與水蒸氣,水發生反應的物質要密封,并遠離水源保存。

      ③ 易與氧氣作用的試劑,應將其固體或晶體密封保存,不宜長期存放其水溶液,亞硫酸,氫硫酸溶液要密封存放,鉀,鈉,白磷更要采用液封形式。

      ④ 與二氧化碳反應的物質要密封保存,其相應的溶液較固體更易反應,所以更要注意密封保存。

      ⑤ 易揮發或自身分解的試劑要密封,放于陰涼通風處保存。

      操作步驟:

      1. 樣品的準備:

      a. 細胞樣品的準備:收集細胞,用4 ℃或冰浴預冷的PBS 或生理鹽水洗滌1-2遍。沉淀用預冷組織細胞裂解液4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類常見電動勻漿器) 。隨后勻漿液4℃離心,取上清作為待測樣品。

      b. 組織樣品的準備:動物用生理鹽水(0.9% NaCl ,含有0.16mg/ml) 灌流清除血液后獲取組織樣品。按照每100mg加入500-1000ul組織細胞裂解液比例, 4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類常見電動勻漿器) 。隨后勻漿液4 ℃離心,取上清作為待測樣品。

      d. 使用BCA蛋白濃度測定試劑盒(P1511)測定蛋白濃度。通常10-20ug蛋白的細胞或組織勻漿液樣品中SOD平均活力約1個活力單位左右(不同細胞和組織的差異會比較大,該活力范圍僅作為初步的參考) 。每種樣品準備20-100 ug蛋白量通常已經足夠用于后續檢測。

      e. 根據蛋白濃度和預計的蛋白使用量,用試劑盒提供的SOD檢測緩沖液適當稀釋樣品。例如,小鼠肝臟通常需要稀釋10-100 倍。準備好的樣品如果當天測定,可以冰浴保存;如果當天不能完成測定,可以-70 ℃凍存,但建議盡量當天完成測定。

      2. 試劑盒的準備工作:

      a. WST-8酶工作液的配制: 參照下表,根據待檢測樣品(包括標準品) 數量,配制適量WST-8酶工作液,配制好的WST-8酶工作液4 ℃或冰浴保存,可當天使用,但建議盡量現配現用。

      注意:由于酶溶液的用量較少且易沉降,必須注意在使用前先輕輕離心一下,然后適當混勻后再使用。

      b. 反應啟動工作液配制:將試劑盒提供的反應啟動液 (40X) 溶解后混勻,按1μl 反應啟動液(40X) 加入39μl SOD 檢測緩沖液的比例進行稀釋,即為反應啟動工作液。4℃或冰浴保存,可當天使用,但建議盡量現配現用。

      c. (可選做) SOD 標準品準備:需自備SOD標準品,用本試劑盒提供的稀釋液將SOD標準品稀釋至如下系列濃度:20U/ml,10U/ml ,5U/ml,2.5U/ml,1.25U/ml,0.625U/ml。在隨后的檢測中可以各取20微升,參考樣品進行檢測。說明:為避免稀釋后SOD酶活性的下降, SOD標準品宜現稀釋現使用;本試劑盒對于SOD的檢測并不需要SOD作為標準品,但可以使用SOD標準品作為陽性對照或作為對SOD活性定量的參考。

      30次 DNA快速連接試劑盒 Rapid DNA Ligation Kit -20℃保存

      2 ug pORF-lacZ pORF-lacZ 低溫運輸,-20℃保存

      3%NaCl氨基酸脫羧對照  20支

      1瓶 UT-7細胞株 UT-7 低溫運輸和保存

      5mL MnCl2溶液,25mM,PCR級 MnCl2 ,PCR Grade -20℃保存

      500mg 硫酸 Gentamycin Sulfate 4℃保存

      50T 胡桃PCR檢測試劑盒  低溫運輸,-20℃保存

      100µL 山羊抗大鼠IgG(H+L),堿性標記 Goat Anti-Rat IgG(H+L),AP -20℃保存

      2 ug pBiFC-bJunVN173 pBiFC-bJunVN173 低溫運輸,-20℃保存

      100g DNGuanidine HCl(鹽酸胍)  

      2 ug pFA2-Elk1 pFA2-Elk1 低溫運輸,-20℃保存

      3磷酸甘油酸激酶(PGK)測試盒微量法OVCA1  卵巢相關基因1抗體 規格: 0.2ml

      Mouse Anti-human IgG/Alexa Fluor 350  Alexa Fluor 350標記的小鼠抗人IgG 規格: 0.1ml

      Hyaluronidase2  透明質酸2/玻璃酸2抗體 規格: 0.2ml

      WWP1  WW結構域E3泛素連接1抗體 規格: 0.2ml

      phospho-c-Abl(Thr754)  磷酸化非受體酪激c-Abl抗體 0.1ml

      WIP1/PPM1D  原基因WIP1抗體 規格: 0.2ml

      ANKRD40  錨蛋白重復結構域蛋白40抗體 規格: 0.2ml

      PDCD6/ALG2  凋亡相關蛋白6抗體 規格: 0.2ml

      HIRA/DGGR1  組蛋白替換蛋白DGGR1抗體 規格: 0.1ml

      Cullin 2  Cullin2抗體 規格: 0.2ml

      phospho-c-Abl(Tyr251)  磷酸化非受體酪激c-Abl抗體 0.1ml

      PAI1/PLANH1/Serpine 1  內皮細胞纖溶原激活抑制蛋白1抗體 規格: 0.2ml

       


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