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      產品中心
      產品名稱:

      3磷酸甘油醛脫氫酶(GAPDH)測試盒微量法

      產品廠地: 上海市
      訪問次數: 311
      更新時間: 2022-05-24
      描述:3磷酸甘油醛脫氫酶(GAPDH)測試盒微量法公司正在出售的產品:含青的TSA表面接觸皿(55cm) 英文名稱: 產品規格:10個/包 大豆酪蛋白瓊脂(TSA)培養基平板(15cm) 英文名稱: 產品規格:10個/包 馬鈴薯葡萄糖瓊脂(PDA)(新藥典) 英文名稱: 產品規格:250g 液體硫乙醇酸鹽培養基(不含瓊脂) 英文名稱:Thioglycollate Medium(without Agar)

      產品介紹

      品牌其他品牌貨號BK-01S6611

      實驗結果判斷我有妙招:

      1、定量測定結果根據標準曲線計算樣品中待測物的含量。

      2、以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結果的閾值。

      3、以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性,P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑,P/N小于1.5為陰性。

      4、ELISA試劑盒目測定性法:加入底物經酶解和終止反應后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照,與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。

      與您分享常用不穩定試劑的分類及要求:

      ① 易揮發、低燃點的試劑要密封,放于陰涼、通風、遠離火源處保存。

      ② 與水蒸氣,水發生反應的物質要密封,并遠離水源保存。

      ③ 易與氧氣作用的試劑,應將其固體或晶體密封保存,不宜長期存放其水溶液,亞硫酸,氫硫酸溶液要密封存放,鉀,鈉,白磷更要采用液封形式。

      ④ 與二氧化碳反應的物質要密封保存,其相應的溶液較固體更易反應,所以更要注意密封保存。

      ⑤ 易揮發或自身分解的試劑要密封,放于陰涼通風處保存。

      本試劑盒僅供研究使用公司實驗室提供免費代測,7個工作日出結果,提供原始數據!

      產品名稱

      規格

      檢測方法

      貨號

      3磷酸甘油醛脫氫酶(GAPDH)測試盒微量法

      100管/96樣

      微量法

      BK-01S6611

      商品介紹:

      測定意義:

      GAPDH催化3-磷酸甘油醛氧化生成1,3-二磷酸甘油酸,是糖酵解途徑的關鍵酶,與糖異生途徑、體內血糖濃度的維持和糖尿病的發生密切相關,在機體糖、脂、蛋白代謝紊亂疾病中發揮重要作用。

      測定原理

      3-磷酸甘油酸激酶催化三磷酸甘油酸和ATP生成1,3二磷酸甘油酸。GAPDH逆向催化1,3二磷酸甘油酸和NADH生成3磷酸甘油醛、無機磷和NAD,340nm處測定NADH的減少量可反映GADPH活性的高低。

      需自備的儀器和用品

      分光光度計、恒溫水浴鍋、臺式離心機、可調式移液器、1 mL石英比色皿、研缽、冰和蒸餾水。

      試劑組成和配制:

      提取液:液體 100 mL×1 瓶,4℃保存。

      試劑一:液體 5 mL×1 瓶,4℃避光保存。

      試劑二:液體 15 mL×1 瓶,4℃保存。

      試劑三:液體 3 mL×1 瓶,4℃保存。

      試劑四:液體 3 mL×1 瓶,4℃保存。
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      操作步驟:

      1. 樣品的準備:

      a. 細胞樣品的準備:收集細胞,用4 ℃或冰浴預冷的PBS 或生理鹽水洗滌1-2遍。沉淀用預冷組織細胞裂解液4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類常見電動勻漿器) 。隨后勻漿液4℃離心,取上清作為待測樣品。

      b. 組織樣品的準備:動物用生理鹽水(0.9% NaCl ,含有0.16mg/ml) 灌流清除血液后獲取組織樣品。按照每100mg加入500-1000ul組織細胞裂解液比例, 4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類常見電動勻漿器) 。隨后勻漿液4 ℃離心,取上清作為待測樣品。

      d. 使用BCA蛋白濃度測定試劑盒(P1511)測定蛋白濃度。通常10-20ug蛋白的細胞或組織勻漿液樣品中SOD平均活力約1個活力單位左右(不同細胞和組織的差異會比較大,該活力范圍僅作為初步的參考) 。每種樣品準備20-100 ug蛋白量通常已經足夠用于后續檢測。

      e. 根據蛋白濃度和預計的蛋白使用量,用試劑盒提供的SOD檢測緩沖液適當稀釋樣品。例如,小鼠肝臟通常需要稀釋10-100 倍。準備好的樣品如果當天測定,可以冰浴保存;如果當天不能完成測定,可以-70 ℃凍存,但建議盡量當天完成測定。

      2. 試劑盒的準備工作:

      a. WST-8酶工作液的配制: 參照下表,根據待檢測樣品(包括標準品) 數量,配制適量WST-8酶工作液,配制好的WST-8酶工作液4 ℃或冰浴保存,可當天使用,但建議盡量現配現用。

      注意:由于酶溶液的用量較少且易沉降,必須注意在使用前先輕輕離心一下,然后適當混勻后再使用。

      b. 反應啟動工作液配制:將試劑盒提供的反應啟動液 (40X) 溶解后混勻,按1μl 反應啟動液(40X) 加入39μl SOD 檢測緩沖液的比例進行稀釋,即為反應啟動工作液。4℃或冰浴保存,可當天使用,但建議盡量現配現用。

      c. (可選做) SOD 標準品準備:需自備SOD標準品,用本試劑盒提供的稀釋液將SOD標準品稀釋至如下系列濃度:20U/ml,10U/ml ,5U/ml,2.5U/ml,1.25U/ml,0.625U/ml。在隨后的檢測中可以各取20微升,參考樣品進行檢測。說明:為避免稀釋后SOD酶活性的下降, SOD標準品宜現稀釋現使用;本試劑盒對于SOD的檢測并不需要SOD作為標準品,但可以使用SOD標準品作為陽性對照或作為對SOD活性定量的參考。

      氧化試劑  1g

      5g 8- 羥基硫酸鹽 8-Hydroxyquinoline Sulfate   室溫避光保存

      50T 蠟樣芽孢桿菌PCR檢測試劑盒  低溫運輸,-20℃保存

      5g 3-(3,4- 二羥基苯 )-L-  3-(3,4-Dithydroxyphenyl)-L-Alanine  室溫干燥保存

      100mL ADA Buffer,0.5M,pH7.4   ADA Buffer,0.5M,pH7.4   常溫保存

      10mL DNA上樣液 (紅色),6× DNAON  4℃保存

      2 ug pGBKT7-Lam pGBKT7-Lam 低溫運輸,-20℃保存

      液體乳糖培養基 Fluid Lactose Medium 250g

      1瓶 COS-7 SV40細胞株 COS-7 SV40 低溫運輸和保存

      PALCAM瓊脂平板(9cm) PALCAM Agar 10個/包

      500U 熱敏 Antarctic Phosphatase -20℃保存

      3磷酸甘油醛脫氫酶(GAPDH)測試盒微量法RSL1D1  細胞衰老抑制基因蛋白抗體 規格: 0.2mlMouse Anti-Bov IgG/APC  APC標記的小鼠抗牛IgG 規格: 0.1ml

      PYGM  肌肉糖原磷酸化抗體 規格: 0.2mlSCF  干細胞生因子抗體 規格: 0.1ml

      MAGE-1  黑色素瘤相關抗原抗體 規格: 0.1mlphospho-MEF2C(Thr300)  磷酸化肌細胞增強因子2C抗體 規格: 0.1ml

      phospho-Kidins220 (Ser918)  磷酸化220kDa蛋白激D相互作用蛋白抗體 規格: 0.1mlDonkey Anti-human IgG/Alexa Fluor 647  Alexa Fluor 647標記的驢抗人IgG 規格: 0.1ml

      DNase I  脫氧核糖核酸1抗體 規格: 0.2mlTPD52L1/D53  瘤蛋白D53抗體 規格: 0.2ml

      KLF9/BTEB1  轉錄因子KLF9抗體 規格: 0.1mlPhospho-Stat2 (Tyr690)  磷酸化信號轉導和轉錄激活因子2抗體 規格: 0.1ml

      PDLIM3/ALP  輔肌動蛋白相關LIM蛋白抗體 規格: 0.2mlFAM81A  FAM81A蛋白抗體 規格: 0.2ml

      IDH3A  草酰琥珀酸脫羧α抗體 規格: 0.2mlPhospho-mu Opioid Receptor (Ser375)  磷酸化µ-型片受體抗體 規格: 0.1ml

      Phospho-Tuberin/TSC2(Ser1798)  磷酸化結節性硬化蛋白抗體 規格: 0.1mlPPAR gamma  過氧化活化增生受體γ抗體 規格: 0.2ml

      ANKMY1  睪特異性錨樣蛋白1抗體 規格: 0.2mlphospho-SOX9(Ser181)  磷酸化轉錄因子SOX9蛋白抗體 規格: 0.1ml

      NFIC  核因子1C型抗體 規格: 0.2mlNuMA  核有絲分裂器NuMA蛋白抗體 規格: 0.2ml

      NT/NTS1/NTRH  神經降壓素抗體 規格: 0.1mlPhospho-FGFR1(Tyr653/654)  磷酸化堿性成纖維細胞生因子受體1抗體 規格: 0.1ml

       


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