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      產品名稱:

      己糖激酶(HK)測試盒微量法

      產品廠地: 上海市
      訪問次數: 323
      更新時間: 2022-05-24
      描述:己糖激酶(HK)測試盒微量法公司正在出售的產品:麥芽糖發酵管(軍團菌) 英文名稱: 產品規格:20支 葡萄糖發酵管(軍團菌) 英文名稱: 產品規格:20支 乳糖發酵管(軍團菌) 英文名稱: 產品規格:20支 假單菌瓊脂基礎培養基/CN瓊脂 英文名稱:CN Agar 產品規格:250g

      產品介紹

      品牌其他品牌貨號BK-01S6601

      本試劑盒僅供研究使用公司實驗室提供免費代測,7個工作日出結果,提供原始數據!

      產品名稱

      規格

      檢測方法

      貨號

      己糖激酶(HK)測試盒微量法

      100管/96樣

      微量法

      BK-01S6601

      商品介紹:

      測定意義:

      HKEC 2.7.1.1)廣泛存在于動物、植物、微生物和培養細胞中,是葡萄糖分解過程中的個關鍵酶,催化葡萄糖轉化為6-磷酸葡萄糖,6-磷酸葡萄糖是糖酵解和磷酸戊糖途徑的交叉點。

      測定原理

      HK催化葡萄糖合成6-磷酸葡萄糖,6-磷酸葡萄糖脫氫酶進一步催化6-磷酸葡萄糖脫氫生成NADPH,NADPH340nm有特征吸收峰。

      需自備的儀器和用品

      紫外分光光度計/酶標儀、恒溫水浴鍋、臺式離心機、可調式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽、冰和蒸餾水。

      試劑組成和配制:

      提取液:液體 100 mL×1 瓶,4℃保存。

      試劑一:液體 5 mL×1 瓶,4℃避光保存。

      試劑二:液體 15 mL×1 瓶,4℃保存。

      試劑三:液體 3 mL×1 瓶,4℃保存。

      試劑四:液體 3 mL×1 瓶,4℃保存。
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      實驗結果判斷我有妙招:

      1、定量測定結果根據標準曲線計算樣品中待測物的含量。

      2、以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結果的閾值。

      3、以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性,P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑,P/N小于1.5為陰性。

      4、ELISA試劑盒目測定性法:加入底物經酶解和終止反應后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照,與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。

      與您分享常用不穩定試劑的分類及要求:

      ① 易揮發、低燃點的試劑要密封,放于陰涼、通風、遠離火源處保存。

      ② 與水蒸氣,水發生反應的物質要密封,并遠離水源保存。

      ③ 易與氧氣作用的試劑,應將其固體或晶體密封保存,不宜長期存放其水溶液,亞硫酸,氫硫酸溶液要密封存放,鉀,鈉,白磷更要采用液封形式。

      ④ 與二氧化碳反應的物質要密封保存,其相應的溶液較固體更易反應,所以更要注意密封保存。

      ⑤ 易揮發或自身分解的試劑要密封,放于陰涼通風處保存。

       

      操作步驟:

      1. 樣品的準備:

      a. 細胞樣品的準備:收集細胞,用4 ℃或冰浴預冷的PBS 或生理鹽水洗滌1-2遍。沉淀用預冷組織細胞裂解液4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類常見電動勻漿器) 。隨后勻漿液4℃離心,取上清作為待測樣品。

      b. 組織樣品的準備:動物用生理鹽水(0.9% NaCl ,含有0.16mg/ml) 灌流清除血液后獲取組織樣品。按照每100mg加入500-1000ul組織細胞裂解液比例, 4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類常見電動勻漿器) 。隨后勻漿液4 ℃離心,取上清作為待測樣品。

      d. 使用BCA蛋白濃度測定試劑盒(P1511)測定蛋白濃度。通常10-20ug蛋白的細胞或組織勻漿液樣品中SOD平均活力約1個活力單位左右(不同細胞和組織的差異會比較大,該活力范圍僅作為初步的參考) 。每種樣品準備20-100 ug蛋白量通常已經足夠用于后續檢測。

      e. 根據蛋白濃度和預計的蛋白使用量,用試劑盒提供的SOD檢測緩沖液適當稀釋樣品。例如,小鼠肝臟通常需要稀釋10-100 倍。準備好的樣品如果當天測定,可以冰浴保存;如果當天不能完成測定,可以-70 ℃凍存,但建議盡量當天完成測定。

      2. 試劑盒的準備工作:

      a. WST-8酶工作液的配制: 參照下表,根據待檢測樣品(包括標準品) 數量,配制適量WST-8酶工作液,配制好的WST-8酶工作液4 ℃或冰浴保存,可當天使用,但建議盡量現配現用。

      注意:由于酶溶液的用量較少且易沉降,必須注意在使用前先輕輕離心一下,然后適當混勻后再使用。

      b. 反應啟動工作液配制:將試劑盒提供的反應啟動液 (40X) 溶解后混勻,按1μl 反應啟動液(40X) 加入39μl SOD 檢測緩沖液的比例進行稀釋,即為反應啟動工作液。4℃或冰浴保存,可當天使用,但建議盡量現配現用。

      c. (可選做) SOD 標準品準備:需自備SOD標準品,用本試劑盒提供的稀釋液將SOD標準品稀釋至如下系列濃度:20U/ml,10U/ml ,5U/ml,2.5U/ml,1.25U/ml,0.625U/ml。在隨后的檢測中可以各取20微升,參考樣品進行檢測。說明:為避免稀釋后SOD酶活性的下降, SOD標準品宜現稀釋現使用;本試劑盒對于SOD的檢測并不需要SOD作為標準品,但可以使用SOD標準品作為陽性對照或作為對SOD活性定量的參考。

      50T 人黏附分子E-cad基因PCR檢測試劑盒  低溫運輸,-20℃保存

      200 mg Catalase(抗氧化) Cell Apoptosis Inducer and Inhibitor -20℃保存

      250ml Glucose Veronal Buffer (GVB)   Glucose Veronal Buffer (GVB)   常溫保存

      0.5mL dNTP溶液(標記專用) dNTP for Labeling -20℃保存

      50mL Ammonium Sulfate Solution(硫酸銨溶液),1M  Ammonium Sulfate Solution,1M  常溫保存

      PNB(對苯甲酸)  1.0g

      1瓶 JEG-3/VP16-IL-2細胞株 JEG-3/VP16-IL-2 低溫運輸和保存

      厭氧培養產品系列  

      0.5mg 化蛋白L Biotin-Protein L -20℃保存

      500mL Sodium Phosphate Buffer(鈉緩沖液),0.2M,pH7.0  Sodium Phosphate Buffer,0.2M,pH7.0  常溫保存

      1 管 GS200酵母菌 GS190 Yeast Strain -80℃保存

      己糖激酶(HK)測試盒微量法PDHB  丙酮酸脫E1β亞單位抗體 規格: 0.2ml

      Glypican 4  磷脂?;嫉鞍拙厶?4抗體 規格: 0.2ml

      cellulase  纖維素抗體 規格: 1ml

      Rabbit Anti-Mink IgG/Cy3  Cy3標記的兔抗水貂IgG 規格: 0.1ml

      Batroxobin  蛇毒巴曲抗體 規格: 0.2ml

      ACSM3  丁?;oA合成3抗體 規格: 0.2ml

      ABCF1  ATP結合盒蛋白家族GCN20F家族1抗體 0.1ml

      Phospho-Caspase-9 (Tyr153)  磷酸化半胱蛋白9抗體 規格: 0.1ml

      E2F4  轉錄因子E2F-4抗體 規格: 0.1ml

      phospho-ADRB2 (Ser261)  磷酸化上素能受體β2抗體 規格: 0.1ml

      Rabbit Anti-Bov IgG/PE-Cy5.5  PE-Cy5.5標記的兔抗牛IgG  規格: 0.1ml

      ARNT2   芳香烴受體核轉錄蛋白2抗體 規格: 0.2ml

       


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