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      產品中心
      產品名稱:

      ATP檸檬酸裂解酶(ACL)測試盒微量法

      產品廠地: 上海市
      訪問次數: 358
      更新時間: 2022-05-24
      描述:ATP檸檬酸裂解酶(ACL)測試盒微量法公司正在出售的產品:麥康凱瓊脂 英文名稱:Maconkey Agar 產品規格:250g 堿性瓊脂平板 英文名稱:Alkaline Agar 產品規格:250g 堿性膽鹽瓊脂 英文名稱: 產品規格:250g PLET瓊脂基礎 英文名稱:PLET Agar Base 產品規格:250g

      產品介紹

      品牌其他品牌貨號BK-01S6663

      商品介紹:

      測定意義:

      ACLEC4.1.3.8)是脂肪酸合成中的關鍵酶,其催化產生的乙??捎糜谥舅岷铣珊吞兼溠娱L、黃酮類物質合成、氨基酸合成等。

      測定原理:

      ACLATP和存在的情況下催化檸檬酸裂解為乙酰、草酰乙酸、腺苷二磷酸和磷酸鹽。蘋果酸脫氫酶進一步催化草酰乙酸和NADH生成蘋果酸和NAD+,在340nm測定NADH減少速率,計算ACL活性。

      需自備的儀器和用品:

      紫外分光光度計、臺式離心機、水浴鍋、移液器、1mL石英比色皿、研缽、冰和蒸餾水

      提取液:液體 100 mL×1 瓶,4℃保存。

      試劑一:液體 5 mL×1 瓶,4℃避光保存。

      試劑二:液體 15 mL×1 瓶,4℃保存。

      試劑三:液體 3 mL×1 瓶,4℃保存。

      試劑四:液體 3 mL×1 瓶,4℃保存。

      本試劑盒僅供研究使用公司實驗室提供免費代測,7個工作日出結果,提供原始數據!

      產品名稱

      規格

      檢測方法

      貨號

      ATP檸檬酸裂解酶(ACL)測試盒微量法

      100管/96樣

      微量法

      BK-01S6663

      11.png 

      實驗結果判斷我有妙招:

      1、定量測定結果根據標準曲線計算樣品中待測物的含量。

      2、以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結果的閾值。

      3、以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性,P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑,P/N小于1.5為陰性。

      4、ELISA試劑盒目測定性法:加入底物經酶解和終止反應后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照,與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。

      與您分享常用不穩定試劑的分類及要求:

      ① 易揮發、低燃點的試劑要密封,放于陰涼、通風、遠離火源處保存。

      ② 與水蒸氣,水發生反應的物質要密封,并遠離水源保存。

      ③ 易與氧氣作用的試劑,應將其固體或晶體密封保存,不宜長期存放其水溶液,亞硫酸,氫硫酸溶液要密封存放,鉀,鈉,白磷更要采用液封形式。

      ④ 與二氧化碳反應的物質要密封保存,其相應的溶液較固體更易反應,所以更要注意密封保存。

      ⑤ 易揮發或自身分解的試劑要密封,放于陰涼通風處保存。

      操作步驟:

      1. 樣品的準備:

      a. 細胞樣品的準備:收集細胞,用4 ℃或冰浴預冷的PBS 或生理鹽水洗滌1-2遍。沉淀用預冷組織細胞裂解液4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類常見電動勻漿器) 。隨后勻漿液4℃離心,取上清作為待測樣品。

      b. 組織樣品的準備:動物用生理鹽水(0.9% NaCl ,含有0.16mg/ml) 灌流清除血液后獲取組織樣品。按照每100mg加入500-1000ul組織細胞裂解液比例, 4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類常見電動勻漿器) 。隨后勻漿液4 ℃離心,取上清作為待測樣品。

      d. 使用BCA蛋白濃度測定試劑盒(P1511)測定蛋白濃度。通常10-20ug蛋白的細胞或組織勻漿液樣品中SOD平均活力約1個活力單位左右(不同細胞和組織的差異會比較大,該活力范圍僅作為初步的參考) 。每種樣品準備20-100 ug蛋白量通常已經足夠用于后續檢測。

      e. 根據蛋白濃度和預計的蛋白使用量,用試劑盒提供的SOD檢測緩沖液適當稀釋樣品。例如,小鼠肝臟通常需要稀釋10-100 倍。準備好的樣品如果當天測定,可以冰浴保存;如果當天不能完成測定,可以-70 ℃凍存,但建議盡量當天完成測定。

      2. 試劑盒的準備工作:

      a. WST-8酶工作液的配制: 參照下表,根據待檢測樣品(包括標準品) 數量,配制適量WST-8酶工作液,配制好的WST-8酶工作液4 ℃或冰浴保存,可當天使用,但建議盡量現配現用。

      注意:由于酶溶液的用量較少且易沉降,必須注意在使用前先輕輕離心一下,然后適當混勻后再使用。

      b. 反應啟動工作液配制:將試劑盒提供的反應啟動液 (40X) 溶解后混勻,按1μl 反應啟動液(40X) 加入39μl SOD 檢測緩沖液的比例進行稀釋,即為反應啟動工作液。4℃或冰浴保存,可當天使用,但建議盡量現配現用。

      c. (可選做) SOD 標準品準備:需自備SOD標準品,用本試劑盒提供的稀釋液將SOD標準品稀釋至如下系列濃度:20U/ml,10U/ml ,5U/ml,2.5U/ml,1.25U/ml,0.625U/ml。在隨后的檢測中可以各取20微升,參考樣品進行檢測。說明:為避免稀釋后SOD酶活性的下降, SOD標準品宜現稀釋現使用;本試劑盒對于SOD的檢測并不需要SOD作為標準品,但可以使用SOD標準品作為陽性對照或作為對SOD活性定量的參考。

      125mL PIPES Lysis Buffer with Triton,2X  PIPES Lysis Buffer with Triton,2X  常溫保存

      1mL 溶液,50mg/mL Carbenicillin Disodium Salt -20℃避光保存

      腸道菌富集肉湯培養基(USP) Enterobacteria Enrichment Broth-Mossel 250g

      50mL ABTS 溶液,7mM  ABTS Solution -20℃避光保存

      2 ug pZL507 pZL507 低溫運輸,-20℃保存

      5次 一步法97孔板單菌落質粒DNAout(離心法) One-Step 96 Microwell Plate Colony Plasmid DNAOUT 常溫

      2 ug pET-48b(+) pET-48b(+) 低溫運輸,-20℃保存

      金氏B培養基管  5ml*20支

      1瓶 A9細胞株 A9 低溫運輸和保存

      GN增菌液顆粒 Gram Negative Enrichment Broth 250g

      100µg 人基因組DNA,男性 Human Genomic DNA 4℃保存

      ATP檸檬酸裂解酶(ACL)測試盒微量法TCF12/HEB  轉錄因子12抗體 規格: 0.2ml

      Goat Anti-human IgM/PE-Cy3  PE-Cy3標記的羊抗人IgM 規格: 0.1ml

      BCL7C  B細胞白/蛋白7抗體 規格: 0.2ml

      phospho-c-Raf(Ser43)  磷酸化原基因c-Raf抗體 規格: 0.1ml

      ARH/LDL receptor adaptor protein  脂蛋白受體銜接蛋白抗體 規格: 0.2ml

      FGF13  纖維母細胞生因子13抗體 規格: 0.2ml

      CD7  CD7抗體 規格: 0.1ml

      phospho-PAK1(Ser144)  磷酸化p21激活激1抗體 規格: 0.1ml

      Gelsolin  凝溶膠蛋白抗體 規格: 0.1ml

      SDF-1/CXCL12  基質細胞衍生因子1抗體 規格: 0.1ml

      Wnt8A  信號通路WNT8A抗體 規格: 0.2ml

      E. coli LPS  大腸桿菌脂多糖抗體 規格: 0.2ml

       


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