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      產品名稱:

      堿性磷酸酶(AKP/ALP)測試盒微量法

      產品廠地: 上海市
      訪問次數: 297
      更新時間: 2022-05-24
      描述:堿性磷酸酶(AKP/ALP)測試盒微量法公司正在出售的產品:紅葡萄糖肉湯 英文名稱:Phenol Red Dextrose Broth 產品規格:250g 硝酸鹽肉湯 英文名稱:Nitrate Broth 產品規格:250g 動力-硝酸鹽培養基(A法) 英文名稱:Power - nitrate medium 產品規格:250g 木糖-明膠培養基 英文名稱:Xylose - gelatin medi

      產品介紹

      品牌其他品牌貨號BK-01S6544

      特別提醒:本產品僅供科研研究使用,不得用于人體臨床直接檢測。

      產品名稱:堿性磷酸酶(AKP/ALP)測試盒微量法

      產品規格:100管/48樣

      檢測方法:微量法

      產品貨號:BK-01S6544

      產品分類:酯酶系列
      商品介紹:

      測定意義:

      AKP/ALP是一種含鋅的糖,在堿性環境中可水解各種天然及人工合成的磷脂單酯化合物。AKP/ALP廣泛分布于人體各臟器中,以肝臟為主。

      測定原理:

      在堿性環境中,AKP/ALP催化磷酸苯二鈉生成游離酚;酚與4-氨基和鐵反應紅色亞醌衍生物,在510nm有特征光吸收;通過測定510 nm吸光度增加速率,來計算AKP活性。

      自備儀器和用品:

      紫外分光光度計/酶標儀、微量石英比色皿/96孔板、臺式離心機、水浴鍋、可調式移液器和蒸餾水。

      所需的儀器和用品:

      可見分光光度計、1mL 玻璃比色皿(光徑 1cm)、低溫離心機、移液器、研缽、冰和蒸餾水

      四、超氧化物歧化酶(SOD)的測定:

      建議正式實驗前選取 2 個樣本做預測定,了解本批樣品情況,熟悉實驗流程,避免實驗

      樣本和試劑浪費!

      1、樣本制備

      組織樣本:

      取約 0.1g 組織(水分充足的樣本可取 0.25g),加入 1mL 提取液,在 4oC 或冰浴進行

      勻漿(或使用各類常見勻漿器)。4oC×12000rpm 離心 10min,取上清作為待測液。

      【注】:若增加樣本量,可按照組織質量(g):提取液體積(mL)15~10 的比例進行提取

       

      細菌/細胞樣本:

      先收集細菌或細胞到離心管內,離心后棄上清;取約 500 萬細菌或細胞加入 1mL

      提取液,超聲波破碎細菌或細胞(冰浴,功率 200W,超聲 3s,間隔 10s,重復 30 次);

      12000rpm 4℃離心 10min,取上清,置冰上待測。

      【注】:若增加樣本量,可按照細菌/細胞數量(10

      4):提取液(mL)為 500~10001 的比例進行提取。 液體樣本:直接檢測;若渾濁,離心后取上清檢測。

      QQ截圖20220307153537.png 

      實驗方法學:

      一、肝素的配制:

      市售肝素凍干粉140單位/mg,1克瓶裝,每瓶140,000單位,稱取0.1克肝素凍干粉,加生理鹽水5ml,配成2800單位/ml。取50~100μl濕潤管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不會凝固。老鼠血易凝固,所以最好更濃一些??梢匀?.1克肝素凍干粉,加3ml生理鹽水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。

      肝素抗凝管的制備:取0.1克肝素凍干粉,加2.5ml生理鹽水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,濕潤管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),橫向轉動,每隔5~10分鐘轉動一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。

      二、血液樣本的收集:

      全血根據收集的條件,分成不抗凝和抗凝兩種。同時,不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清;抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。

      1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1~2小時,直接低速離心分離出血清待用或保存。

      2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據不同抗凝劑的性能特征,選擇合適的抗凝劑。實驗室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA及。

      選擇抗凝的注意點:

      ①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時所取的全血的量也要盡量一致;

      ②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導致凝固;

      ③、抗凝全血收集的血漿相對較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);

      ④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時可能會出現絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后

      用于測定。

      500mL TBS-Tween-20 (TTBS),10X TBS-Tween-20 (TTBS),10X 常溫保存

      10mL 鈷柱介質 Co-Agarose Resin 4℃保存

      2 ug pSUPER-retro-GFP/Neo pSUPER-retro-GFP/Neo 低溫運輸,-20℃保存

      1mL RNase-free 水 RNase-free Water 常溫

      2 ug pCold II pCold II 低溫運輸,-20℃保存

      SCHAEDLER瓊脂 SCHAEDLER AGAR 250g

      1g Pyridoxamine HCl -20℃避光保存

      50T 嗜肺軍團菌16S rRNA基因熒光PCR檢測試劑盒(探針法)  低溫運輸,-20℃保存

      10 μg  Okadaic acid鉀鹽(PP1和PP2A抑制劑) Cell Apoptosis Inducer and Inhibitor -20℃保存

      250mL Formalin-Sodium Acetate Solution Formalin-Sodium Acetate Solution 常溫保存

      5次 天凈沙非同位素探針雜交試劑盒(適用常規DNA/RNA探針) Nonradioactive Probe Hybridization Kit 雜交液-20℃保存,其余成分常溫

      堿性磷酸酶(AKP/ALP)測試盒微量法GPAM  線粒體甘油3磷酸?;D移抗體 規格: 0.2ml

      UBF1  核仁轉錄因子1抗體 規格: 0.1ml

      CEP128  中心體蛋白128抗體 規格: 0.2ml

      CHRNB2  堿型乙酰受體B2抗體 規格: 0.2ml

      CKLFH3/CMTM3  趨化素樣因子超家族成員3抗體 規格: 0.2ml

      ApoER2  載脂蛋白E2受體抗體 規格: 0.1ml

      Glypican 5  磷脂?;嫉鞍拙厶?5抗體 規格: 0.2ml

      HSP1/Protamine P1  子魚蛋白P1抗體 規格: 0.2ml

      Phospho-EGFR(Tyr845)  磷酸化表皮生因子受體抗體 規格: 0.1ml

      Rabbit Anti-Monkey IgG/PE  PE標記的兔抗猴IgG 規格: 0.1ml

      CD33L/OBBP1  CD33L抗體 規格: 0.2ml

      p70 S6 Kinase Beta 2/P70 Beta 2  核糖體S6蛋白激β2抗體 規格: 0.2ml 

      注意事項:

      1、試劑二為酶,不可冷凍,使用時在冰上放置。

      2、對照管只需要做一管。

      3、若對照管吸光值大于2,建議將試劑二用蒸餾水稀釋7倍后使用(10μl試劑二原液+60μl蒸餾水)。

      4、SOD為什么有的樣本測定管大于對照管,對照管數值在什么范圍?

      對照管的范圍是0.8-2。對照管吸光值過低可能是(1)試劑二或試劑四沒有現配現用;(2)沒有按順序加試劑;(3)反應時間不夠,可以延長反應時間(反應時間30min可以延長到40min)。對照管吸光值過高可能是試劑二未按操作說明書稀釋相應倍數。

      若出現測定管大于對照管,可能是樣本中雜質的影響太大,為了降低雜質的影響一般將樣本提取上清液用蒸餾水或提取液稀釋10倍后再測,通??梢允箿y定正常。計算公式中乘以相應稀釋倍數。

       


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