服務熱線
13564080845
歡迎訪問上海帛科生物技術有限公司網站
021-60767003產品介紹
品牌 | 其他品牌 | 貨號 | BK-01S6467 |
---|
本試劑盒僅供研究使用公司實驗室提供免費代測,7個工作日出結果,提供原始數據!
產品名稱 | 規格 | 檢測方法 | 貨號 |
花青素還原酶(ANR)測試盒可見分光光度法 | 50管/48樣 | 可見分光光度法 | BK-01S6467 |
商品介紹:
測定意義: 花青素還原酶是黃酮合成途徑中的關鍵酶,在植物體內起非常重要的調控作用,對花青素還原酶的調控機制研究有利于從基因水平改變植物的品質。 測定原理: 花青素還原酶在NADPH存在的條件下作用于飛燕草色素轉變為表沒食子兒茶素和NADP,使反應體系在340nm處的吸光值下降,吸光值下降速率反應了花青素還原酶的活性。 需自備的儀器和用品: 天平、研缽、低溫離心機、紫外分光光度計、1mL石英比色皿、蒸餾水。 |
試劑組成和配制:
提取液:液體 100 mL×1 瓶,4℃保存。
試劑一:液體 5 mL×1 瓶,4℃避光保存。
試劑二:液體 15 mL×1 瓶,4℃保存。
試劑三:液體 3 mL×1 瓶,4℃保存。
試劑四:液體 3 mL×1 瓶,4℃保存。
實驗結果判斷我有妙招:
1、定量測定結果根據標準曲線計算樣品中待測物的含量。
2、以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結果的閾值。
3、以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性,P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑,P/N小于1.5為陰性。
4、ELISA試劑盒目測定性法:加入底物經酶解和終止反應后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照,與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。
與您分享常用不穩定試劑的分類及要求:
① 易揮發、低燃點的試劑要密封,放于陰涼、通風、遠離火源處保存。
② 與水蒸氣,水發生反應的物質要密封,并遠離水源保存。
③ 易與氧氣作用的試劑,應將其固體或晶體密封保存,不宜長期存放其水溶液,亞硫酸,氫硫酸溶液要密封存放,鉀,鈉,白磷更要采用液封形式。
④ 與二氧化碳反應的物質要密封保存,其相應的溶液較固體更易反應,所以更要注意密封保存。
⑤ 易揮發或自身分解的試劑要密封,放于陰涼通風處保存。
操作步驟:
1. 樣品的準備:
a. 細胞樣品的準備:收集細胞,用4 ℃或冰浴預冷的PBS 或生理鹽水洗滌1-2遍。沉淀用預冷組織細胞裂解液4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類常見電動勻漿器) 。隨后勻漿液4℃離心,取上清作為待測樣品。
b. 組織樣品的準備:動物用生理鹽水(0.9% NaCl ,含有0.16mg/ml) 灌流清除血液后獲取組織樣品。按照每100mg加入500-1000ul組織細胞裂解液比例, 4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類常見電動勻漿器) 。隨后勻漿液4 ℃離心,取上清作為待測樣品。
d. 使用BCA蛋白濃度測定試劑盒(P1511)測定蛋白濃度。通常10-20ug蛋白的細胞或組織勻漿液樣品中SOD平均活力約1個活力單位左右(不同細胞和組織的差異會比較大,該活力范圍僅作為初步的參考) 。每種樣品準備20-100 ug蛋白量通常已經足夠用于后續檢測。
e. 根據蛋白濃度和預計的蛋白使用量,用試劑盒提供的SOD檢測緩沖液適當稀釋樣品。例如,小鼠肝臟通常需要稀釋10-100 倍。準備好的樣品如果當天測定,可以冰浴保存;如果當天不能完成測定,可以-70 ℃凍存,但建議盡量當天完成測定。
2. 試劑盒的準備工作:
a. WST-8酶工作液的配制: 參照下表,根據待檢測樣品(包括標準品) 數量,配制適量WST-8酶工作液,配制好的WST-8酶工作液4 ℃或冰浴保存,可當天使用,但建議盡量現配現用。
注意:由于酶溶液的用量較少且易沉降,必須注意在使用前先輕輕離心一下,然后適當混勻后再使用。
b. 反應啟動工作液配制:將試劑盒提供的反應啟動液 (40X) 溶解后混勻,按1μl 反應啟動液(40X) 加入39μl SOD 檢測緩沖液的比例進行稀釋,即為反應啟動工作液。4℃或冰浴保存,可當天使用,但建議盡量現配現用。
c. (可選做) SOD 標準品準備:需自備SOD標準品,用本試劑盒提供的稀釋液將SOD標準品稀釋至如下系列濃度:20U/ml,10U/ml ,5U/ml,2.5U/ml,1.25U/ml,0.625U/ml。在隨后的檢測中可以各取20微升,參考樣品進行檢測。說明:為避免稀釋后SOD酶活性的下降, SOD標準品宜現稀釋現使用;本試劑盒對于SOD的檢測并不需要SOD作為標準品,但可以使用SOD標準品作為陽性對照或作為對SOD活性定量的參考。
250mL PIPES Lysis Buffer with NP-40 PIPES Lysis Buffer with NP-40 常溫保存
1mL 溶液,100mg/mL Bacitracin Solution -20℃保存
2 ug pPICZα A pPICZα A 低溫運輸,-20℃保存
實驗用對照生化管 20支/盒
100mL 吐溫 -80 Tween-80 室溫密封保存
96支 10 μL RNase-free 白吸頭(盒裝已滅菌帶芯) 常溫
25 T 超微量ATP測試盒(Na+K+、Ca2+Mg2+ATPase) Oxidative Stress Detection Kit 常溫保存
5mg Leucine Solution(溶液),0.3% Leucine Solution,0.3% 常溫保存
50次 通用型LAMP試劑盒 Universal LAMP Amplification Kit -20℃保存
2 ug pLVX-cGFP I pLVX-cGFP I 低溫運輸,-20℃保存
GVC增菌液 GVC Enrichment Broth 250g
花青素還原酶(ANR)測試盒可見分光光度法AIMP3/p18 抑蛋白AIMP3抗體 規格: 0.2ml
PDZD5A/FRMPD2L2 PDZ結構域PDZK5A蛋白抗體 規格: 0.2ml
PMP22 外周髓鞘蛋白-22抗體 規格: 0.1ml
Layilin 透明質酸受體抗體 規格: 0.1ml
Nucleolar protein 3/Apoptosis repressor with CARD 核仁蛋白3抗體 規格: 0.2ml
Donkey Anti-Goat IgG/Alexa Fluor 350 Alexa Fluor 350標記的驢抗羊IgG 規格: 0.1ml
TAF12 TATA框結合蛋白關聯因子12抗體 規格: 0.1ml
C16orf61 16號染色體開放閱讀框61抗體 規格: 0.2ml
Angiotensin I/Angiotensinogen 管緊張素I抗體 規格: 0.2ml
SLPI/ALK1 分泌型白細胞蛋白抑制因子抗體 規格: 0.2ml
COX3 氧化亞基3抗體 規格: 0.2ml
SPARC 富含半胱的酸性分泌蛋白抗體 規格: 0.2ml
相關產品
地址:上海松江區莘磚公路518號5號樓601室
版權所有 © 2023 上海帛科生物技術有限公司 備案號:滬ICP備2021006739號-1 管理登陸 技術支持:環保在線 sitemap.xml