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      超氧陰離子測試盒微量法

      產品廠地: 上海市
      訪問次數: 513
      更新時間: 2022-05-24
      描述:本試劑盒僅供研究使用公司實驗室提供免費代測,7個工作日出結果,提供原始數據!
      產品名稱規格檢測方法貨號
      超氧陰離子測試盒微量法100管/96樣微量法BK-01S6431
      商品介紹:
      測定意義:
      生物體內超氧陰離子等活性氧具有免疫和信號傳導的作用,但積累過多時會對細胞膜及生物大分子產生破壞作用,導致機體細胞和組織代謝異常,從而引起多種疾病。
      測定原理:
      超氧陰離子與鹽酸羥胺反應生成NO2

      產品介紹

      品牌其他品牌貨號BK-01S6431

      本試劑盒僅供研究使用公司實驗室提供免費代測,7個工作日出結果,提供原始數據!

      產品名稱

      規格

      檢測方法

      貨號

      超氧陰離子測試盒微量法

      100管/96樣

      微量法

      BK-01S6431

      商品介紹:

      測定意義:

      生物體內超氧陰離子等活性氧具有免疫和信號傳導的作用,但積累過多時會對細胞膜及生物大分子產生破壞作用,導致機體細胞和組織代謝異常,從而引起多種疾病。

      測定原理:

      超氧陰離子與鹽酸羥胺反應生成NO2-,NO2-在對氨基苯磺酸和α-萘胺的作用下,生成紅色的偶氮化合物,在530nm處有特征吸收峰,根據A530值可以計算樣品中O2-含量。

      自備實驗用品及儀器:

      天平、水浴鍋、離心機、可見分光光度計/酶標儀、微量石英比色皿/96孔板、氯仿和蒸餾水。

      試劑組成和配制:

      提取液:液體 100 mL×1 瓶,4℃保存。

      試劑一:液體 5 mL×1 瓶,4℃避光保存。11.png

      試劑二:液體 15 mL×1 瓶,4℃保存。

      試劑三:液體 3 mL×1 瓶,4℃保存。

      試劑四:液體 3 mL×1 瓶,4℃保存。

      實驗結果判斷我有妙招:

      1、定量測定結果根據標準曲線計算樣品中待測物的含量。

      2、以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結果的閾值。

      3、以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性,P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑,P/N小于1.5為陰性。

      4、ELISA試劑盒目測定性法:加入底物經酶解和終止反應后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照,與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。

      與您分享常用不穩定試劑的分類及要求:

      ① 易揮發、低燃點的試劑要密封,放于陰涼、通風、遠離火源處保存。

      ② 與水蒸氣,水發生反應的物質要密封,并遠離水源保存。

      ③ 易與氧氣作用的試劑,應將其固體或晶體密封保存,不宜長期存放其水溶液,亞硫酸,氫硫酸溶液要密封存放,鉀,鈉,白磷更要采用液封形式。

      ④ 與二氧化碳反應的物質要密封保存,其相應的溶液較固體更易反應,所以更要注意密封保存。

      ⑤ 易揮發或自身分解的試劑要密封,放于陰涼通風處保存。

       

      操作步驟:

      1. 樣品的準備:

      a. 細胞樣品的準備:收集細胞,用4 ℃或冰浴預冷的PBS 或生理鹽水洗滌1-2遍。沉淀用預冷組織細胞裂解液4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類常見電動勻漿器) 。隨后勻漿液4℃離心,取上清作為待測樣品。

      b. 組織樣品的準備:動物用生理鹽水(0.9% NaCl ,含有0.16mg/ml) 灌流清除血液后獲取組織樣品。按照每100mg加入500-1000ul組織細胞裂解液比例, 4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類常見電動勻漿器) 。隨后勻漿液4 ℃離心,取上清作為待測樣品。

      d. 使用BCA蛋白濃度測定試劑盒(P1511)測定蛋白濃度。通常10-20ug蛋白的細胞或組織勻漿液樣品中SOD平均活力約1個活力單位左右(不同細胞和組織的差異會比較大,該活力范圍僅作為初步的參考) 。每種樣品準備20-100 ug蛋白量通常已經足夠用于后續檢測。

      e. 根據蛋白濃度和預計的蛋白使用量,用試劑盒提供的SOD檢測緩沖液適當稀釋樣品。例如,小鼠肝臟通常需要稀釋10-100 倍。準備好的樣品如果當天測定,可以冰浴保存;如果當天不能完成測定,可以-70 ℃凍存,但建議盡量當天完成測定。

      2. 試劑盒的準備工作:

      a. WST-8酶工作液的配制: 參照下表,根據待檢測樣品(包括標準品) 數量,配制適量WST-8酶工作液,配制好的WST-8酶工作液4 ℃或冰浴保存,可當天使用,但建議盡量現配現用。

      注意:由于酶溶液的用量較少且易沉降,必須注意在使用前先輕輕離心一下,然后適當混勻后再使用。

      b. 反應啟動工作液配制:將試劑盒提供的反應啟動液 (40X) 溶解后混勻,按1μl 反應啟動液(40X) 加入39μl SOD 檢測緩沖液的比例進行稀釋,即為反應啟動工作液。4℃或冰浴保存,可當天使用,但建議盡量現配現用。

      c. (可選做) SOD 標準品準備:需自備SOD標準品,用本試劑盒提供的稀釋液將SOD標準品稀釋至如下系列濃度:20U/ml,10U/ml ,5U/ml,2.5U/ml,1.25U/ml,0.625U/ml。在隨后的檢測中可以各取20微升,參考樣品進行檢測。說明:為避免稀釋后SOD酶活性的下降, SOD標準品宜現稀釋現使用;本試劑盒對于SOD的檢測并不需要SOD作為標準品,但可以使用SOD標準品作為陽性對照或作為對SOD活性定量的參考。

      50次 雙染細胞凋亡檢測試劑盒 Double-Stain Apoptosis Detection Kit 4℃避光保存

      250mL IEF Cathode Buffer,10X IEF Cathode Buffer,10X 常溫保存

      100次 即用型熒光定量PCR試劑盒 Instant Fluorescent qPCR Kit -20℃保存

      2 ug pLV-cGFPII pLV-cGFPII 低溫運輸,-20℃保存

      脆弱擬桿菌活化培養基肉湯 Bacteroides Phage Recovery Medium Broth 250g

      1瓶 NCI-H295R細胞株 NCI-H295R 低溫運輸和保存

      m-遠藤氏培養基 M-Endo Medium 250g

      1mg 親和素 Avidin, Chicken Egg White -20℃保存

      500mL Tris-HCl Buffer,1.0M,pH6.8   Tris-HCl Buffer,1.0M,pH6.8   常溫保存

      1mg 重組蛋白G Recombinant Protein G -20℃保存

      2 ug pBAD/gIII C pBAD/gIII C 低溫運輸,-20℃保存

      超氧陰離子測試盒微量法GLO1  乙二醛1抗體 規格: 0.1mlTIMP-1(CT)  金屬蛋白組織抑制因子-1抗體(C端) 0.1ml

      ChRM3/Acetylcholine receptor(M3)  毒蕈堿型乙酰受體M3抗體 規格: 0.1mlCCL15/MIP5  巨噬細胞性蛋白15 規格: 0.1ml

      PNAT/NAT2  N-乙?;D移2抗體 規格: 0.1mlDHRSX  短鏈脫/還原家族X抗體 規格: 0.2ml

      HMGA1/HMG-I/HMG-Y  高遷移率族蛋白A1抗體 規格: 0.2mlKLLN   Killin-p53調節復制抑制蛋白抗體 規格: 0.2ml

      PTGER1  前列素EP1受體抗體 規格: 0.1mlNoggin  指(趾)關節粘連NOG蛋白抗體 0.2ml

      phospho-PI3K p85/PIK3R1(Tyr368)  磷酸化磷脂酰肌醇激抗體 規格: 0.1mlIGSF16/CD300C  免疫球蛋白超家族成員16抗體 規格: 0.2ml

      PRKD1/PKC mu  蛋白激C mu型抗體 規格: 0.2mlphospho-PAK1+PAK2+PAK3 (Ser141)  磷酸化p21激活激1/2/3抗體 規格: 0.1ml

      NS5ATP9/KIAA0101  丙型毒非結構蛋白5A反式激活蛋白9抗體 規格: 0.2mlIFNAR2/IFNABR  干擾素α受體2抗體 規格: 0.2ml

      CD4  CD4抗體 0.1mlFOXO1  叉蛋白O1抗體 規格: 0.1ml

      CLEC2D/OCIL  CLEC2D蛋白抗體 規格: 0.2ml

      HSPB7/cvHSP  熱休克蛋白β7抗體 規格: 0.2ml

      SLC16A7/MCT2  單羧酸轉運蛋白2抗體 規格: 0.1ml

       


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