胃蛋白酶Pepsin活性測定試劑盒

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儀器：
1、分光光度計/酶標儀/半自動生化分析儀（比色測定波長為550nm）
2、恒溫水浴箱或氣浴箱 （孵育溫度為37℃）
3、臺式離心機
4、漩渦混勻器
5、微量移液器
樣本收集與前處理：
血清（漿）可直接測定。
紅細胞：需按照試劑盒中說明書上紅細胞的測定方法進行提取后測定。
動物組織樣本：可用生理鹽水按重量體積比制備成組織勻漿液，離心取上清測定。
培養細胞、細菌、植物組織：常用PBS作為勻漿介質破碎后離心取上清測定。
具體的樣本前處理：參考我們隨貨發送的《實驗方法學》以及試劑盒中詳細說明書。

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測定步驟：
1.加樣
1. 除包被外都需45度加樣
2.加樣體積要準確
3.管底加樣，不能加在管壁上
4.加樣時不能產生氣泡
2.加溫
1.加標本后和加結合物后，應立即放入按規定的反應溫 度的水浴箱。
2.各ELISA板不應疊在一起。
3.為避免蒸發，板上應加蓋，或將板平放在底部墊有濕 紗布的金屬濕盒中。
4.加入底物后，反應的時間和溫度通常不做嚴格要求。 如室溫高于20℃，ELISA板可避光放在實驗臺上，以便 不時觀察，待對照管顯色適當時，即可終止酶反應。
3.洗滌
1.洗滌在ELISA過程中不是反應步驟，但卻 是決定實驗成敗的關鍵。
2.目的是洗去反應液中沒有與固相抗原或 抗體結合的物質以及在反應過程中非特 異性吸附于固相載體的干擾物質。
4.讀板
1.陰性對照顏色極淺，在定性測定中一般 可采用目視比色。
2.如用酶標儀測定結果，準確性決定于 ELISA板底的平整與透明度、酶標儀的質 量和軟件的算法。
優點如下：
1、快速簡便：全程約50分鐘，可測100例左右樣本。
2、取樣量微：本法取手指或耳垂等末梢血20ul～50ul即可測紅細胞中的SOD，只需2ml靜脈血可測白細胞中的SOD及血小板中SOD，只需50mg左右組織就可測組織勻漿、胞漿中的SOD，0.2g組織可測線粒體及微粒體中的SOD。
3、靈敏度高：IC50=0.05g/ml，是鄰苯三酚法的18倍。
4、穩定性好：試劑盒2～8℃存放6個月有效。
5、再現性好：變異系數CV=1.7%。
6、回收試驗： X =103.3%。
7、受外界影響因素?。焊蓴_因素少，重復性強。
8、測試面廣：可測動物血液、組織、各種體液、灌流液等、各種培養細胞、細菌、植物組織、各種水產以及化妝品、保健品等，效果均佳。
CD86 Others Cynomolgus 食蟹猴 CD86 / B7-2 人細胞裂解液 (陽性對照) 二十七烷shēng huà shì jì容量：保存：-20℃500毫克

兔晶體上皮細胞永生系;N/N1003A(RLE)無水錄化(II) CHROMIUM(II) CHLORIDq 10049-02-2

QG-56細胞，人肺扁平上皮癌細胞 中國倉鼠倉鼠卵巢細胞亞株,CHO-K1細胞 CM-M010小鼠肺大動脈平滑肌細胞*培養基100mL聚乙二醇 12000 Poly(ethylene glycol) 12,000 (PEG 12000) 25322-68-3 500G 通用試劑

Saos-2(人骨肉瘤細胞) 5×106cells/瓶×2赤霉素GA4+7shēng huà shì jì容量：RT5克

Gibco 12558-011 TM-C100 Complete Medium,(system) 1 setDicamba 1g/5g Sigma 523844
T-112B胰凝乳蛋白酶(含100mL酶解緩沖液)10mL纖粘連蛋白shēng huà shì jì容量：RT1克

CADM3 Others Rat 大鼠 CADM3 / NECL1 / IGSF4B 人細胞裂解液 (陽性對照) 5-溴-2-典嘧啶 5-Bromo-2-iodopyrimidinq 183438-4-6

上皮細胞生長添加物EpiCGS維生素A棕櫚酸酯shēng huà shì jì容量：10克

Hs 578T細胞，人成纖維細胞 人原胚腎轉化細胞系,293 Ad5+細胞 胰島β細胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)戊二酸5克

雪羊皮膚細胞;SSHS1(番紅O)
MuM-2B細胞，人眼脈絡色素瘤細胞 光孢短柄帚霉 野生型人c-kit受體細胞株;A7d炔雌醇 3-β-D-葡萄糖苷酸Ethynyl Estradiol 3-β-D-Glucuronide質量規格：美國進口

趨化因子3-O- 4-羥基雌二醇3-O-Methyl 4-Hydroxy Estradiol質量規格：美國進口

LLC-MK2(恒河猴腎細胞) 5×106cells/瓶×2 甲型流感 H3N2 (A/Hong Kong/1/1968) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 17α-雌二醇-16,16,17-d317α-Estradiol-16,16,17-d3質量規格：美國進口

小耳豬肺細胞;SEP-L2炔雌醇-2,4,16,16-d4Ethynyl Estradiol-2,4,16,16-d4質量規格：美國進口

人膀胱平滑肌細胞(HBdSMC)( 5×105 )炔雌醇3-硫酸鹽Ethynyl Estradiol 3-Sulfate質量規格：美國進口
胃蛋白酶Pepsin活性測定試劑盒CADM3 Others Rat 大鼠 CADM3 / NECL1 / IGSF4B 人細胞裂解液 (陽性對照) 丹磺酰質量規格：>98%DNSCl, Dansyl chloride

上皮細胞生長添加物EpiCGSN-乙基順丁1二質量規格：>98%,BRN-Ethylmaleimide

Hs 578T細胞，人成纖維細胞 人原胚腎轉化細胞系,293 Ad5+細胞 胰島β細胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)順式-4,7,10,13,16,19-二十二碳六1酸(標準品)質量規格：分析標準品DHA

雪羊皮膚細胞;SSHS1二甲硝咪唑(標準品)質量規格：分析標準品Dimetridazole

S100A4 Others Human 人 S100A4 人細胞裂解液 (陽性對照) 青霉素V鉀(標準品)質量規格：分析標準品Penicillin V potassium salt
實驗通用規則：
1、洗液不夠時，可用蒸餾水自行配制PH7.4，0.02M的磷酸緩沖液，加入0.1%的吐溫20作為洗液。加入1/1000的疊氮鈉后可長期保存。
2、液體全部加完后，可將酶標板在桌子上平行輕輕晃動30秒，混勻液體。也可以用酶標儀的晃動功能。
3、底物有一定的毒性，終止液對皮膚有腐蝕性，應盡量避免接觸。
4、檢測前，要打開酶標儀，使之穩定10分鐘以上。
5、吸取液體時，要用量程和需要量接近的槍去吸，減少誤差。
6、將液體加到酶標孔中時，避免槍頭和孔內液體接觸，可使槍頭上的液滴和孔壁接觸，液滴會自然流下去。
7、溫浴時，要用不干膠或膠帶紙封好酶標板，防止水分的蒸發。
8、洗板時，每次洗液加入后，應靜置1分鐘，使清洗更加*。沒有洗板機時，倒去液體后，要將酶標板在報紙或毛紙上用力拍干。
9、用槍吸取液體時速度不能太快，以免產生氣泡而使吸取量不準確。
10、底物是光敏感的，要在臨用前現配。

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